Lineweaver-Burke diagram
Lineweaver-Burk plot , Lineweaver-Burk vagy reciprocal doubles plot , egy grafikus módszer a Lineweaver-Burk egyenlet ábrázolására, amely egy enzim kinetikáját jellemzi. A biokémiában és az enzimológiában használják. A módszert először Hans Lineweaver és Dean Burke írta le 1934-ben [1] .
A kísérleti adatok kényelmesebb grafikus ábrázolása érdekében Lineweaver és Burke a Briggs-Haldane egyenletet (a Michaelis-Menten egyenlet levezetését) a kettős reciprok módszere szerint transzformálta, azon az elven alapulva, hogy ha van egyenlőség bármely kettő között. mennyiségek, akkor a reciprok is egyenlő lesz.
A Lineweaver-Burk görbe akkor helyes, ha az enzimkinetika az ideális másodrendű reakciók kinetikáját követi, de nem-lineáris regresszió szükséges a nem ideálisan viselkedő rendszerekben. A dupla inverz diagram torzítja az adathibák mintázatát, ezért nem a legpontosabb eszköz az enzimkinetikai paraméterek meghatározására. A paraméterek kiszámításához általában a Michaelis-Menten egyenlet nemlineáris regresszióját vagy alternatív lineáris formáit , például a Haynes-Wulff- vagy az Eady-Hofstey-diagramot [2] használják .
Következtetés
A Lineweaver-Burk egyenlet grafikus ábrázolása egy egyenes, amely a következő alaknak felel meg: y = ax + b. Alakítsuk át a Michaelis-Menten egyenletet lineáris formává a V max és K m értékek kényelmesebb kiszámításához . Különösen, ha:
,![{\displaystyle V={\frac {V_{\max }[S]}{K_{m}+[S]}}}](https://wikimedia.org/api/rest_v1/media/math/render/svg/8fa5b35e10661c7592ae5bc59429f1033a4acbf8)
akkor
![{\displaystyle {1 \over V}={{K_{m}+[S]} \over V_{\max }[S]}={K_{m} \over V_{\max }}{1 \over [S]}+{1 \over V_{\max }}}](https://wikimedia.org/api/rest_v1/media/math/render/svg/262e1440a8ad30a692b153178eabbf6e7f45d48f)
amelyet Lineweaver-Burk egyenletnek neveznek.
Most ennek az egyenletnek megfelelően 1/[S] (x) [3]-ból 1/[S] (x) [3] 1/V (y) koordinátájú gráfot készíthetünk , miközben kapunk egy egyenest, a lejtőszög érintőjét, amely egyenlő legyen a K m /V max értékkel ; az y tengelytől egyenes vonallal levágott szakasz 1/V max (a maximális sebesség reciproka). Ha az egyenest az y tengelyen túl folytatjuk, akkor a Michaelis-állandó -1 / K m reciprokának megfelelő szakaszt levágjuk az abszcisszán . Így a Km értéke kiszámítható az egyenes meredekségének és az ordináta tengelyről levágott szakasz hosszának adataiból, vagy az abszcissza tengelyből levágott szakasz hosszából a negatív tartományban. értékeket.
Jegyzetek
- ↑ Lineweaver, Hans; Burk, Dean (1934. március). "Az enzimdisszociációs állandók meghatározása" . Az American Chemical Society folyóirata ]. 56 (3): 658-666. DOI : 10.1021/ja01318a036 . ISSN 0002-7863 . Archiválva az eredetiből, ekkor: 2021-09-16 . Letöltve: 2021-10-04 . Elavult használt paraméter |deadlink=( súgó )
- ↑ Greco, WR; Hakala, M. T. (1979-12-10). „A szoros kötésű enzimgátlók disszociációs állandójának becslésére szolgáló módszerek értékelése”. The Journal of Biological Chemistry . 254 (23): 12104-12109. DOI : 10.1016/S0021-9258(19)86435-9 . ISSN 0021-9258 . PMID 500698 .
- ↑ Christensen, Siegfried B.; DeWolf, Walter E.; Ryan, M. Dominic és Torphy, Theodore J. (1996-01-01), Schudt, Christian; Dent, Gordon & Rabe, Klaus F., szerk., 13 - Molecular Aspects of Inhibitor Interaction with PDE4 , Handbook of Immunopharmacology, San Diego: Academic Press, p. 185–207, ISBN 978-0-12-210720-7 , doi : 10.1016/b978-012210720-7/50015-0 , < http://www.sciencedirect.com/science/article/pii > 5007081200708 Letöltve: 2020. december 15. Archiválva : 2021. október 4. a Wayback Machine -nél
| Enzimek | |
|---|---|
| Tevékenység | |
| Szabályozás | |
| Osztályozás | |
| Típusok |
|