Terápiás angiogenezis

A terápiás angiogenezis (más néven biológiai shunting ) új vérerek képződésének stimulálása olyan kóros állapotok kezelésére vagy megelőzésére, amelyeket e funkció csökkenése jellemez [1] .

Hatókör

A terápiás angiogenezis iránti igény a krónikus alsó végtagi ischaemia (CLLI), szívkoszorúér-betegség , szívinfarktus disztális formáira összpontosul , amelyekben a sebészeti kezelési módszerek vagy lehetetlenek, vagy nem elég hatékonyak, és nagy gyakorisággal társulnak. ellenjavallatok és szövődmények [2] [3] .

A terápiás angiogenezis története

A terápiás angiogenezis koncepciója J. Folkman munkája után kezdett kialakulni , aki elméletet dolgozott ki a megfelelő vérellátás kialakításáról és fenntartásáról a tumorszövetekben lévő angiogén növekedési faktorok segítségével.
A vérerek növekedési faktorainak azonosítása után a kutatók elkezdték tesztelni az angiogenezis stimulálására vonatkozó hipotéziseket az ischaemiás állapotok kezelésében. A klinikai gyakorlatban először alkalmazott terápiás angiogenezist J. Isner. 1994-ben egy 71 éves, súlyos állapotú, kritikus alsó végtagi ischaemiával (CLLI) szenvedő, A. V. Pokrovsky-Fontein osztályozása szerint IV. fokú betegbe bevitték a VEGF-165 gént egy plazmid vektorba [4] [ 5] .
A következő klinikai vizsgáló I. Baumgartner volt, aki számos vizsgálatot végzett CLLI-s betegeken, leírta és osztályozta a lehetséges mellékhatásokat [6] .

A terápiás angiogenezis mechanizmusa

Hagyományosan két folyamat áll a terápiás angiogenezis hátterében: angiogenezis és vasculogenesis [7] .
A vasculogenesis az a folyamat, amelyben az endothel progenitor sejtekből (EPC) származó erek in situ képződnek, amelyek vándorolnak és más endothel progenitor sejtekkel kapillárisokba olvadnak össze, és endothel sejtekké differenciálódnak, új ereket képezve. Ez a forma leggyakrabban az embrionális időszakban [8] .
Az angiogenezis magában foglalja a már kialakult erek meghosszabbítását, és új kapillárisok sarjadásának folyamata, beleértve az endothel sejtek aktiválódását, az extracelluláris mátrix lebomlását, az endotheliociták proliferációját és migrációját, valamint a primer, nagy permeábilis vaszkuláris struktúrák kialakulását. Ezt követően az elsődleges vaszkuláris struktúrák stabilizálódása és „növekedése” más típusú sejtek: periciták és simaizomsejtek toborzása következtében következik be, ami egy összetett, háromdimenziós érhálózat szerveződését eredményezi [8] .
Az angiogenezis fő stimuláló tényezője fiziológiás és kóros körülmények között az oxigénhiány. A hipoxia serkenti a legtöbb angiogén faktor képződését, és mindenekelőtt az angiogenezis fő szabályozója a szervezet embrionális és posztnatális fejlődési periódusában - a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor (VEGF) és receptorai (VEGF-R). Több mint 20 olyan tényezőt azonosítottak, amelyek stimulálják vagy gátolják az angiogenezis folyamatát (1. táblázat). Egyes tényezők, a dózistól függően, az angiogenezis indukálói és inhibitorai is lehetnek [9] [10] . Jelenleg a "terápiás angiogenezis" kifejezés magában foglalja mindkét fent leírt eljárást az új vérerek növekedésére [11] [12] [13] .

1. táblázat  – "Angiogenezis induktorai és gátlói"

A terápiás angiogenezis klinikai módszerei

A terápiás angiogenezis folyamatához különféle terápiás megközelítéseket alkalmaznak:

• rekombináns fehérjék bevezetése - angiogenezis induktorok (növekedési faktorok);
• sejtterápia alkalmazása;
• faktorokat kódoló génkonstrukciók bevezetése.

Rekombináns fehérjék bevezetése - angiogenezis induktorai

A vaszkuláris endothel növekedési faktor élettani hatásainak részletes ismeretében és a vérképzést serkentő fehérjefaktorok alkalmazásában szerzett pozitív tapasztalatok birtokában a tudósok vaszkuláris endoteliális növekedési faktor és alapvető fibroblaszt növekedési faktor (bFGF) fehérjemolekuláit szintetizálták.
Az első nem kontrollált klinikai vizsgálatok koszorúér-betegségben és kritikus alsó végtag ischaemiában (CLLI) szenvedő betegeken rekombináns fehérjéket alkalmazva biztató előzetes eredményeket mutattak a hatékonyság tekintetében. A kettős vak, placebo-kontrollos vizsgálatokból származó adatok azonban kevésbé voltak optimisták. Két nagy tanulmány, amelyekben a rekombináns növekedési faktorok intrakoronáris beadását tesztelték (VEGF a VIVA vizsgálatban 178 CAD-betegben, akik nem voltak optimális jelöltek sebészeti vagy endovaszkuláris revaszkularizációra; FGF-2 a FIRST vizsgálatban 337 hasonló betegnél), nem találtak különbséget a placebo csoportokat eredményez.
A TRAFFIC vizsgálatban (az FGF-2-t kétszer adták be a femoralis artériába CLLI-ben szenvedő betegeknél), amelyben az első 3 hónapban FGF-2-t kapóknál kifejezettebb volt a fájdalommentes járás időtartamának növekedése. 6 hónap után kiegyenlített. a fájdalommentes járási idő növelésével a placebo-csoportban. Ennek a tanulmánynak az eredményei azonban bizakodásra adnak okot a rekombináns FGF-2 CLLI-ben való alkalmazásának lehetőségét illetően.
Lehetséges, hogy a rekombináns növekedési faktorokat alkalmazó terápiás angiogenezis kontrollált vizsgálatainak kudarca a faktor helytelenül kiválasztott módszerének tudható be. A rekombináns fehérjék felezési ideje rövid a véráramban, ráadásul kimutatták, hogy intravaszkuláris adagolás esetén a fehérje nagyon kis része visszamarad a szívizomban (intravénás beadás esetén 0,1%, intracoronáris adagolás esetén 5% ). A rekombináns növekedési faktorok hatékony felhasználásához lokálisan a szívizomba vagy a vázizmokba kell bejuttatni azokat mátrixfehérjékkel komplexek formájában, amelyek biztosítják a faktor hosszú távú lokális felszabadulását [14] .

Sejtterápia alkalmazása

Az új erek képződését jelenleg két egymással összefüggő folyamatnak tekintik - az angiogenezisnek és az érképződésnek. A vasculogenezis magában foglalja a csontvelő endothel progenitor sejtjeinek (EPC) részvételét, amelyek az új érképződés helyére költöznek, ahol már a helyükön lévő endothel sejtekké differenciálódnak. A végtagok ischaemiás megbetegedéseinél a sejtterápiának leginkább tanulmányozott módszere az EPC-sejtek véráramba történő felszabadulásának serkentése, a véráramból való izolálása és az ischaemiás területre történő bejuttatása. A preklinikai és számos klinikai vizsgálat elemzése alapján megállapítható, hogy az endoteliocita prekurzorok bevezetése vagy az endothel sejt prekurzorok felszabadulásának stimulálása felgyorsítja a kollaterális erek képződését, miközben minimalizálja az ischaemiás károsodás területét. Az eljáráshoz azonban speciálisan felszerelt laboratóriumra van szükség, és a kapott sejtek száma általában változó.
A felnőtt szervezetből származó őssejtek (SC) angiogén hatásának mechanizmusa feltehetően a sejtek szekréciós aktivitásával és specifikus vaszkuláris sejtekké történő differenciálódásával, valamint szöveti sejtekkel való fúziójával kapcsolatos parakrin hatásokat foglal magában. Ezen mechanizmusok fajlagos súlya még nem teljesen meghatározott, és a kísérleti adatok meglehetősen ellentmondásosak. Azonban a neovaszkularizáció stimulálása az SC bevezetésével nagymértékben a szekréciós aktivitásuknak köszönhető. Ezt támasztja alá az a tény, hogy a kísérleti állatok szívizomjában az erek számának növekedését figyelték meg szinte minden sejtterápiához használt sejttípus bejuttatásával: a csontvelő hematopoetikus és mezenchimális sejtjei, EK-prekurzorok (keringő és csontvelő), a köldökzsinórvérből nyert sejtek, sőt a csontváz myoblasztjai is [14] [15] .

Növekedési faktorokat kódoló génkonstrukciók bevezetése

A rekombináns fehérjeterápia alternatívája lehet a génterápia . Kétféle vektorrendszer uralkodik, melyeket terápiás génnek az ischaemiás régióba juttatására használnak: plazmidok és rekombináns adenovírusok [16] .
A rekombináns fehérjéktől eltérően a genetikai konstrukciók egy héttől több hétig hatnak a célszövetben, és kevésbé hirtelen és hosszabb ideig növelik az angiogén faktor tartalmát, ami elkerüli a gyakori és ismételt injekciókat, ami viszont elkerüli a szervezet szenzibilizációját [14]. . A preklinikai állatkísérletek során a DNS-plazmidok használata néhány naptól több hónapig tartó génexpressziót mutatott ki, és a további átvitel valószínűsége meglehetősen alacsony. Ez az időszak viszonylag rövidnek tekinthető a vírusvektorokhoz képest, ami a plazmidvektoron alapuló készítmény biztonsági tényezője. A plazmidokat extracellulárisan és intracellulárisan a nukleázok pusztítják el , ami biztosítja a folyamat lokalizációját és időbeli korlátozását. Az angiogenezis stimulálására irányuló számos génterápiás vizsgálat során főként helyi injekciókat alkalmaztak a maximális biztonság és hatékonyság elérése érdekében [17] .
Az adenovírus vektorok alkalmazását a génanyag átvitel nagy hatékonysága jellemzi. De figyelembe kell venni, hogy az adenovírus antitestek gyakran jelen vannak az emberi szervezetben, ami 5% -ra csökkenti az átvitel hatékonyságát - ez a szint a nem vírusos géntranszfer jellemzőihez hasonlítható. Ezenkívül a vírusos géntranszfer speciális biológiai biztonsági intézkedéseket igényel, amelyek nem szükségesek a nem vírusos géntranszfer vektorok esetében. A biztonsági kérdések az adenovírus-vektorokkal végzett klinikai vizsgálatok során a nemkívánatos események megnövekedett előfordulásában is megmutatkoznak: átmeneti láz, emelkedett C-reaktív fehérje, emelkedett májenzim-szintek és adenovírus-antitest-titerek [18] .

A plazmidban vagy a rekombináns vírusban található információ realizálása a fehérjeszintézis eredményeként történik. A szintézis a hagyományos módon történik ( átírás , fordítás ). Az angiogén növekedési faktor képződése számos fiziológiai változást okoz, amelyek új ér növekedéséhez vezetnek. Az angiogenezis folyamatában számos angiogén faktor vesz részt, de a legaktívabb proangiogén citokin a vascularis endothelialis növekedési faktor (VEGF), amely a preklinikai és klinikai vizsgálatokban is a legtöbbet vizsgált.

Az erek növekedésének folyamata a részvételével a következő sorrendben írható le [11] :

1. A VEGF kötődése az endotélsejtek felszínén lévő receptorokhoz a meglévő erekben.
2. Az endotheliociták aktiválása a VEGF-receptorok konfigurációjában bekövetkezett változások miatt.
3. Az aktivált endothelsejtek proteolitikus enzimek felszabadítása, amelyek feloldják az anyai ereket körülvevő bazális membránt.
4. A mátrixanyag oldása mátrix metalloproteázokkal.
5. Az endothel sejtek proliferációja és migrációja az alapmembránon keresztül az ischaemiás zónába a sejtfelszínen lévő adhéziós molekulák segítségével.
6. Az endotheliocyták egymáshoz kötődése és tubuláris struktúrák kialakulása.
7. Vaszkuláris hurkok kialakulása.
8. A vaszkuláris hurkok differenciálása artériás és vénás erekre.
9. Új erek érése más típusú sejtek (simaizom, periciták) parietális kötődésével és az érrendszer stabilizálása.
10. A véráramlás kezdete érett, stabil érben.

Anyagok angiogén módosítása (vitalizálás)

A behelyezett implantátumok érágyának hiánya, valamint annak nem kellően gyors fejlődése és a recipiens terület érhálózatába való integrálódása az egyik legfontosabb probléma, amely az implantátum „működésképtelenségével” kapcsolatos. A mesterséges implantátumok vaszkularizációs problémájának megoldása kétféleképpen alakul: 1 - a beültetés utáni aktív vaszkularizáció feltételeinek megteremtése különféle biomérnöki struktúrák segítségével (növekedési faktorok, őssejtek felhasználásával); 2 - a vaszkuláris hálózat létrehozása a testbe történő in vitro beültetés előtt [19] .

A vaszkuláris endoteliális növekedési faktorokat kódoló plazmidokon alapuló génterápiás készítményeket szintetikus rostos anyagok angiogén módosítására ( vitalizálására ) használják [7] . Az ilyen módosított génaktivált anyagokat biológiailag módosított szervek és szövetek vaszkularizált mátrixainak létrehozására használják [7] [20] .

Génkészítmények terápiás angiogenezishez

A terápiás angiogenezissel és növekedési faktorokkal kapcsolatos publikációk igénylésekor az adatbázisban az alábbi statisztikákat kaptuk:

A klinikai vizsgálatot a VEGF gént hordozó génterápiás konstrukciók uralják. A 2. számú táblázat az ezekkel a prototípus gyógyszerekkel végzett és folyamatban lévő főbb tanulmányokat tükrözi.

2. táblázat : A VEGF gént tartalmazó génterápiás konstrukciók klinikai vizsgálata

Rövidítések: IHD – ischaemiás szívbetegség; HINK - az alsó végtagok krónikus ischaemia; KINK - az alsó végtagok kritikus ischaemia

Az első és egyetlen terápiás angiogenezis génterápiás gyógyszerét 2011-ben regisztrálták Oroszországban (az Üzbég Köztársaság dátuma – 2011.09.28.). A gyógyszer egy plazmid szuperspirált dezoxiribonukleinsav, pCMV-VEGF165, amely humán vaszkuláris endotél növekedési faktort kódol. A gyógyszer alkalmazására vonatkozó javallatok: komplex terápiában az alsó végtagok atheroscleroticus eredetű iszkémiájának revascularisatiójában (IIa-III fokozat A.V. Pokrovsky-Fontein szerint). A gyógyszer " Neovasculgen
" márkanéven lépett a piacra . Lokálisan, intramuszkulárisan, az ischaemiás területhez lehető legközelebb alkalmazva serkenti a kollaterális keringés kialakulását. [2, 38, 39] Az orosz gyógyszer klinikai vizsgálatainak eredményei szerint a terápiás angiogenezis következő klinikai jellemzői figyelhetők meg:

1. A gyógyszer komplex konzervatív kezelésben történő alkalmazása stabil klinikai javuláshoz vezet (a hatás 3 hónap, 6 hónap, 1 év, 2 év megőrzése), ami a fájdalommentes sétatávolság növekedésében, a járási idő növekedésében fejeződik ki. boka-brachialis index és transzkután oxigénfeszültség [17] .
2. A III. stádiumú ischaemiában szenvedő betegeknél A. V. Pokrovsky-Fontein osztályozása szerint a „nagy amputációk száma, halálozás” mutató 6% [2].
3. Kifejezett klinikai hatás az alsó végtagok ischaemiájának különböző súlyossági fokaiban A. V. Pokrovsky-Fontein osztályozása szerint (IIa, IIb, III) [38].

3. táblázat : A VEGF-et kódoló nukleinsav (Neovasculgen) alapú gyógyszer komplex konzervatív terápiában történő alkalmazásának eredményei [17] .

* statisztikailag szignifikáns különbségek a kiindulási értékhez képest (p≤0,05, nem paraméteres Wilcoxon teszt).
Az indikátorok dinamikájának értékelésekor, figyelembe véve az ischaemia kezdeti fokát, azt találtuk, hogy minden betegcsoportra (IIA, IIB, az ischaemia III. stádiuma) jellemző tartós pozitív dinamika. Így a fájdalommentes gyaloglás távolsága nagyobb mértékben nőtt közepes és súlyos ischaemiában, amit a 90 napos növekedés is bizonyít. 160%-kal és 173%-kal a IIB és III. ischaemia, ill. Nagyon szignifikánsnak tűnik, hogy a betegek legsúlyosabb csoportjában az ABI 0,33±0,08-ról 0,46±0,07-re több mint 0,1-gyel nőtt 90 nap után. egy év alatt pedig akár 0,48±0,1. Ugyanez a tendencia volt megfigyelhető a TcPO2 tekintetében - súlyosabb betegeknél a terápiára adott válasz kifejezettebb volt (90 nap után 35,2%-os és egy év után 32,5%-os növekedés).

4. táblázat: A VEGF-et kódoló nukleinsav (Neovasculgen) alapú gyógyszer komplex konzervatív terápiában történő alkalmazásának eredményei [21] .

* statisztikailag szignifikáns különbségek az alapvonalhoz képest
' statisztikailag szignifikáns különbségek 90 nap között. és 1 év (p≤0,05, nem paraméteres Wilcoxon-teszt).

Jegyzetek

1. ↑ Hockel M., Schlenger K., Doctrow S. és mtsai. Terápiás angiogenezis. Arch Surg. 1993; 128:423-9.
2. ↑ Schwalb P. G., Gavrilenko A. V. , Kalinin R. E. és munkatársai : A Neovasculgen hatékonysága és biztonságossága az alsó végtagok krónikus ischaemiájában szenvedő betegek komplex terápiájában (a klinikai vizsgálatok IIb-III fázisa) . Sejttranszplantológia és szövetsebészet . 2011; 3:76-83.
3. ↑ Mzhavanadze N.D., Bozo I.Ya., Kalinin R.E., Deev R.V. A génterápia alkalmazásának valósága és kilátásai a szív- és érrendszeri sebészetben Sejttranszplantológia és szövetsebészet . 2012; 2:51-5.
4. ↑ Isner J., Walsh K., Symes J. et al. Artériás génterápia terápiás angiogenezishez perifériás artériás betegségben szenvedő betegeknél. keringés. 1995; 91:2687-92.
5. ↑ Isner J., Pieczek A., Schainfeld R., Blair R. et al. Az angiogenezis klinikai bizonyítékai a phVEGF165 artériás géntranszfer után ischaemiás végtagban szenvedő betegeknél. Lancet 1996 Aug 10;348(9024):370-4.
6. ↑ Baumgartner I., Rauh G., Pieczek A. et al. A vaszkuláris endoteliális növekedési faktort kódoló csupasz DNS génátvitelével kapcsolatos alsó végtagi ödéma. Ann Intern Med. 2000; 132(11):880-4.
7. ↑ 1 2 3 Klabukov I.D., Balyasin M.V., Lundup A.V., Krasheninnikov M.E., Titov A.S., Mudryak D.L., Shepelev A.D., Tenchurin T.Kh., Chvalun S.N., Dyuzheva T.G. A biokompatibilis és biológiailag lebontható mátrix angiogén vitalizálása (in vivo kísérleti vizsgálat)  // Patológiai élettan és kísérleti terápia. - 2018. - T. 62 , 2. sz . - S. 53-60 . — ISSN 0031-2991 . Archiválva az eredetiből 2018. június 26-án. (Orosz)
8. ↑ 1 2 Madeddu P. Terápiás angiogenezis és vasculogenesis a szövetek regenerációjához. kísérleti élettan. 2004; 90:315-26.
9. ↑ Mäkinen K. Angiogenezis – új cél a perifériás artériák elzáródásos betegségeinek terápiájában. Acta Chir Belg. 2003; 103:470-4.
10. ↑ Malecki M., Kolsut P., Proczka R. Angiogén és antiangiogén génterápia. Génterápia. 2005; 12:159-69.
11. ↑ 1 2 Li W., Li V. Angiogenesis a sebgyógyulásban. Kortárs sebészet. Kiegészítő a kortárs sebészethez. 2003; 36.
12. ↑ Azrin M. Angiogenezis, fehérje- és génszállítás. British Medical Bulletin 2001; 59:211-25.
13. ↑ Sylven C. Angiogén génterápia. Napjaink drogjai. 2002; 38:819-27.
14. ↑ 1 2 3 Parfenova E. V., Tkachuk V. A. Terápiás angiogenezis: eredmények, problémák, kilátások. Kardiológiai Közlöny. 2007; 2:5-15.
15. ↑ Isner J., Vale P., Losordo D. és el. Angiogenezis és szív- és érrendszeri betegségek. Párbeszédek a szív- és érrendszeri gyógyászatban, 2001:3:145-70.
16. ↑ Grigorjan A.S., Sevcsenko K.G. A VEGF gént tartalmazó plazmid konstrukciók működésének lehetséges molekuláris mechanizmusai . Sejtátültetés és szövetsebészet. 2011; 6 (3):24-8.
17. ↑ 1 2 3 Deev R. V., Chervyakov Yu. V., Kalinin R. E. et al. Egy endoteliális vaszkuláris növekedési faktort („Neovasculgen”) kódoló nukleinsavon alapuló gyógyszer alkalmazásának elméleti és gyakorlati vonatkozásai. Angiologia.ru. 2011; egy.
18. ↑ Meyer F., Finer M. Génterápia: haladás és kihívások. Cell Moi Biol (Noisy-le-grand). 2001; 47:1277-94.
19. ↑ Reshetov I.V., Zalyanin A.S., Filippov V.V., Kharkova N.V., Sukortseva N.S., Popov V.K., Mirtov A.V., Komlev V.S. Biomérnöki struktúrák vitalizálásának módjai a mozgásszervi rendszer helyreállításához (az RFBR pályázat keretein belül a „3D egyedi implantátumok érrendszeri és beidegzési módjainak tanulmányozása a mozgásszervi rendszer helyreállításához” témában)  // Fej, ill . nyak 1/2. - 2016. - május. - S. 55-59 . — ISSN 2310-5194 . Archiválva az eredetiből 2018. június 27-én.
20. ↑ Deev, R. V., Drobyshev, A. Yu., Bozo, I. Ya., Galetsky, D. V., Korolev, V. O., Eremin, I. I., ... & Isaev, A A. (2013). A humán VEGF gént hordozó génaktivált oszteoplasztikus anyag biológiai hatásának létrehozása és értékelése Archivált 2018. június 26-án a Wayback Machine -nél . Genes and Cells , 8 (3), 78-85.
21. ↑ Deev R.V. , Kalinin R.E., Chervyakov Yu.V. Az Országos Orvosi és Sebészeti Központ közleménye. N. I. Pirogov. 2011; 4:20-5.

Irodalom

1. Hockel M., Schlenger K., Doctrow S. és mtsai. Terápiás angiogenezis. Arch Surg. 1993; 128:423-9.
2. Shvalb P. G., Gavrilenko A. V. , Kalinin R. E. és munkatársai : A Neovasculgen hatékonysága és biztonságossága az alsó végtagok krónikus ischaemiás betegek komplex terápiájában (a klinikai vizsgálatok IIb-III fázisa). KTTI. 2011; 3:76-83.
3. Mzhavanadze N.D., Bozo I.Ya., Kalinin R.E., Deev R.V. A génterápia alkalmazásának valósága és kilátásai a szív- és érrendszeri sebészetben. CTTI 2012; 2:51-5.
4. Isner J., Walsh K., Symes J. et al. Artériás génterápia terápiás angiogenezishez perifériás artériás betegségben szenvedő betegeknél. keringés. 1995; 91:2687-92.
5. Isner J., Pieczek A., Schainfeld R., Blair R. et al. Az angiogenezis klinikai bizonyítékai a phVEGF165 artériás géntranszfer után ischaemiás végtagban szenvedő betegeknél. Lancet 1996 Aug 10;348(9024):370-4.
6. Baumgartner I., Rauh G., Pieczek A. et al. A vaszkuláris endoteliális növekedési faktort kódoló csupasz DNS génátvitelével kapcsolatos alsó végtagi ödéma. Ann Intern Med. 2000; 132(11):880-4.
7. Madeddu P. Terápiás angiogenezis és vasculogenesis a szövetek regenerálására. kísérleti élettan. 2004; 90:315-26.
8. Mäkinen K. Angiogenesis – új cél a perifériás artériák elzáródásos betegségeinek terápiájában. Acta Chir Belg. 2003; 103:470-4.
9. Malecki M., Kolsut P., Proczka R. Angiogén és antiangiogén génterápia. Génterápia. 2005; 12:159-69.
10. Li W., Li V. Angiogenezis a sebgyógyulásban. Kortárs sebészet. Kiegészítő a kortárs sebészethez. 2003; 36.
11. Azrin M. Angiogenezis, fehérje- és génszállítás. British Medical Bulletin 2001; 59:211-25.
12. Sylven C. Angiogén génterápia. Napjaink drogjai. 2002; 38:819-27.
13. Parfenova E. V., Tkachuk V. A. Terápiás angiogenezis: eredmények, problémák, kilátások. Kardiológiai Közlöny. 2007; 2:5-15.
14. Isner J., Vale P., Losordo D. és el. Angiogenezis és szív- és érrendszeri betegségek. Párbeszédek a szív- és érrendszeri gyógyászatban, 2001:3:145-70.
15. Grigorjan A.S., Sevcsenko K.G. A VEGF gént tartalmazó plazmid konstrukciók működésének lehetséges molekuláris mechanizmusai . CTTI 2011; 6 (3):24-8.
16. Deev R. V., Chervyakov Yu. V., Kalinin R. E. és munkatársai Az endoteliális vaszkuláris növekedési faktort ("Neovasculgen") kódoló nukleinsavon alapuló gyógyszer alkalmazásának elméleti és gyakorlati vonatkozásai. Angiologia.ru. 2011; egy.
17. Meyer F., Finer M. Génterápia: haladás és kihívások. Cell Moi Biol (Noisy-le-grand). 2001; 47:1277-94.
18. Baumgartner I., Pieczek A., Manor O. et al. A phVEGF165 konstitutív expressziója intramuszkuláris géntranszfer után elősegíti a kollaterális érfejlődést kritikus végtagi ischaemiában szenvedő betegeknél. 1998-as példányszám; 97:1114-23.
19. Symes J., Losordo D., Vale P. et al. Génterápia vaszkuláris endoteliális növekedési faktorral inoperábilis koszorúér-betegség esetén. Ann Thorac Surg 1999; 68:830-36.
20. Fortuin F., Vale P., Losordo D. et al. A vaszkuláris endothel növekedési faktor-2 közvetlen szívizom géntranszferjének egyéves követése csupasz plazmid dezoxiribonukleinsav segítségével mellkasi műtét útján nem választható betegeknél. J Cardiol vagyok. 2003; 92:436-9.
21. Reilly J., Grise M., Fortuin F. et al. Hosszú távú (2 éves) klinikai események a VEGF-2 transzthoracalis intramyocardialis géntranszfert követően noopciós betegekben. J Interv Cardiol. 2005; 18:27-31.
22. Vale P., Losordo D., Milliken C. et al. Bal kamrai elektromechanikus térképezés a phVEGF (165) géntranszfer hatékonyságának felmérésére a terápiás angiogenezisben krónikus szívizom ischaemiában. 2000-es példányszám; 102:965-74.
23. Sarkar N., Ruck A., Kallner G. et al. A phVEGF-A165 intramyocardiális injekciójának, mint egyedüli terápiának a hatásai refrakter koszorúér-betegségben szenvedő betegeknél – 12 hónapos követés: angiogén génterápia. J Intern Med. 2001; 250:373-81.
24. Losordo D., Vale P., Hendel R. et al. Fázis 1/2 placebo-kontrollos, kettős-vak, dózisnövelő vizsgálat a myocardialis vascularis endothelialis növekedési faktor 2 géntranszfer katéteres bejuttatásával krónikus szívizom ischaemiában szenvedő betegeknél. 2002-es példányszám; 105:2012-18.
25. Gyöngyosi M., Khorsand A., Zamini S. et al. Az A-165 vaszkuláris endoteliális növekedési faktort kódoló plazmid intramyocardiális injekcióival kezelt regionális szívizom perfúziós rendellenességeinek NOGA által irányított elemzése krónikus szívizom iszkémiában szenvedő betegeknél: az EUROINJECT-ONE multicentrikus kettős vak, randomizált vizsgálat szubanalizája. 2005-ös példányszám; 112 (Kiegészítő): I157-I165.
26. Kastrup J., Jorgensen E., Ruck A. et al. Közvetlen intramyocardialis plazmid vaszkuláris endoteliális növekedési faktor-A165 génterápia stabil, súlyos angina pectorisban szenvedő betegeknél. Egy randomizált kettős-vak, placebo-kontrollos vizsgálat: az Euroinject One Trial. J Am Call Cardiol. 2005; 45:982-8.
27. Stewart D., Kutryk M., Fitchett D. et al. A VEGF génterápia nem javítja az ischaemiás szívizom perfúzióját előrehaladott koszorúér-betegségben szenvedő betegeknél: a NORTHERN vizsgálat eredményei. Mol. Ott. 2009; 17:1109-15.
28. Mendiz O., Favaloro L., Diez M. et al. Absztrakt 15235: nagy dózisú plazmid VEGF géntranszfer súlyos koszorúér-betegségben szenvedő betegeknél: a szívizom ischaemia génterápiájának első latin-amerikai vizsgálatának végeredménye. 2011-es példányszám; 124 (Kiegészítő): A15235.
29. Kusumanto Y., van Weel V., Mulder N. et al. Kezelés intramuszkuláris vaszkuláris endothel növekedési faktor génnel a placebóval összehasonlítva diabetes mellitusban és kritikus végtag ischaemiában szenvedő betegeknél: kettős vak, randomizált vizsgálat. Hum Gene Ther 2006; 17:683-91.
30. Kukula K., Chojnowska L., Dabrowski M. et al. Intramyocardialis plazmidot kódoló humán vaszkuláris endothel növekedési faktor A165/bázis fibroblaszt növekedési faktor terápia perkután transzkatéteres megközelítéssel refrakter coronaria betegségben (VIF-CAD) szenvedő betegeknél. Am Heart J 2011; 161:581-9.
31. Makinen K., Manninen H., Hedman M. et al. Digitális kivonásos angiográfiával kimutatott megnövekedett vaszkulárisság a VEGF gén humán alsó végtagi artériába történő átvitele után: randomizált, placebo-kontrollos, kettős vak II. fázisú vizsgálat. Mol Ther 2002; 6:127-33.
32. Hedman M., Hartikainen J., Syvanne M. et al. A katéter alapú lokális intrakoronáris vaszkuláris endoteliális növekedési faktor géntranszfer biztonságossága és megvalósíthatósága posztangioplasztika és in-stent resztenózis megelőzésében, valamint krónikus szívizom ischaemia kezelésében: a Kuopio Angiogenesis Trial (KAT) fázis II. eredményei. 2003-as példányszám; 107:2677-83.
33. Rajagopalan S., Mohler III E., Lederman R. et al. Regionális angiogenezis vaszkuláris endoteliális növekedési faktorral (VEGF) perifériás artériás betegségben: a RAVE-vizsgálat tervezése. Am Heart J 2003; 145:1114-18.
34. Rosengart T., Lee L., Patel S. et al. Angiogenezis génterápia: VEGF121 cDNS-t expresszáló adenovírus vektor közvetlen intramyocardiális beadásának I. fázisú értékelése klinikailag jelentős, súlyos koszorúér-betegségben szenvedő egyéneknek. Kiadás 1999; 100:468-74.
35. Stewart D., Hilton J., Arnold J. et al. Angiogén génterápia nem revaszkularizálható ischaemiás szívbetegségben szenvedő betegeknél: az AdVEGF (121) (AdVEGF121) 2. fázisú randomizált, kontrollált vizsgálata a maximális orvosi kezeléssel szemben. Génterápia 2006; 13:1503-11.
36. Kastrup J., Jorgensen E., Fuchs S. et al. Randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos, többközpontú vizsgálat a BIOBYPASS (AdGVVEGF121.10NH) génterápia biztonságosságáról és hatékonyságáról refrakter előrehaladott koszorúér-betegségben szenvedő betegeknél: a NOVA-vizsgálat. Euro Intervention 2011; 6:813-18.
37. Ropper A., ​​Gorson K., Gooch C. et al. Vaszkuláris endoteliális növekedési faktor géntranszfer diabéteszes polyneuropathiához: randomizált, kettős vak vizsgálat. Ann Neurol 2009; 65:386-93.
38. Deev R. V., Kalinin R. E., Chervyakov Yu. V. és munkatársai A "Neovasculgen" génterápiás gyógyszer alkalmazásának eredményei az alsó végtagok krónikus ischaemiájában szenvedő betegeknél: 1 éves követés. Az Országos Orvosi és Sebészeti Központ közleménye. N. I. Pirogov. 2011; 4:20-5.
39. Schwalb P. G., Kalinin R. E., Gryaznov S. V. és munkatársai : Egy génterápiás gyógyszer biztonságossága és rövid távú hatékonysága krónikus alsó végtagi ischaemiában szenvedő betegeknél. Kardiológia és szív- és érrendszeri sebészet. 2011; 4:61-6.