Szarvasmarha szérum albumin

A szarvasmarha-szérumalbumin (rövidítve : BSA , eng.  Bovine Serum Albumin, BSA ) egy 69 000 Da molekulatömegű , egyszálú, 607 aminosavból álló szarvasmarha -plazmafehérje .

Szerkezet és tulajdonságok

A szarvasmarha szérumalbumin (BSA) a legszélesebb körben tanulmányozott és a legnagyobb mennyiségben előforduló vérfehérje (a teljes fehérje-összetétel 70%-a). Plazmakoncentrációja 35-55 mg/ml.

A szarvasmarha-szérumalbumin egy lapos forgásellipszoid formájú, 17 x 42 angström méretű féltengelyű gömböcske, amely 607 aminosavból áll, listája és száma a táblázatban található:

A BSA meglehetősen bonyolult térszerkezettel rendelkezik, három tartományt alkot, amelyek mindegyike két aldomainre (AB és C) van felosztva. Mindegyik aldomén 3 hélixre osztható, X, Y és Z. A BSA másodlagos szerkezete az (1H NMR) adatok szerint 50-68%-ban alfa-hélixből, 16-18%-ban béta-redőkből áll. A tercier szerkezetet diszulfid kötések alkotják, amelyekből 17 darab van a BSA molekulában (a cisztein aminosavak száma szerint). A BSA molekulatömege = ~69 kDa.

Ez egy kényelmes modell a globuláris fehérjék tulajdonságainak tanulmányozására.

Alkalmazások a laboratóriumi gyakorlatban

A kiindulási anyag rendelkezésre állása, a stabil izolálási eljárások, és ebből adódóan a viszonylag alacsony ár és a jól ismert tulajdonságok miatt a szarvasmarha-szérumalbumint széles körben alkalmazzák a laboratóriumi gyakorlatban.

A BSA-t standardként használják a fehérjék mennyiségi meghatározására szolgáló különféle módszerekben, a fehérjék molekulatömegének (marker) standardjaként a gélkromatográfiában és a denaturált állapotban végzett fehérjeelektroforézisben ( SDS -PAGE ), valamint standard antigénként is. az immunválasz változásainak meghatározásában immunmodulátorok vagy más tényezők hatására. Bizonyos enzimek, különösen a restrikciós endonukleázok stabilizálására is használják. Megakadályozza az enzimek tapadását az érfalakhoz.

Getting

Primitív módszerek:

1. „A vérszérumba (fibrinmentes vér) a szérum térfogatának húszszorosának megfelelő mennyiségben vizet öntünk, majd ecetsav óvatos hozzáadásával kicsapják a globulint. Miután a folyadékot leülepedni hagytuk, szűrjük és szódával semlegesítjük, 40°-on bepároljuk, és a sók nagy részét dialízissel izoláljuk.
2. „Technikai célokra úgy készítik, hogy közvetlenül az állatból több literes, sekély cinkpoharakba vérezik. Addig hűtik, amíg össze nem gömbölyödik; ügyelni kell arra, hogy a frissen vett vér ne rázódjon meg, ezért a műtét helyét az állat közelében kell megválasztani. Amikor a vér teljesen megalvadt, ugyanabba a perforált aljú edénybe kerül, és a vérrögöt apró darabokra vágják, hogy a szérum kifolyjon. A szérumot összegyűjtik és mérsékelt hőmérsékleten bepárolják, a maradékot albuminnak nevezik. Kerülni kell a rázást, mert ez felszakítja a vörösvértesteket és elrontja a termék színét. Öt bika körülbelül 20 liter szérumot és körülbelül 2 kg albumint termel.

Források

• Bovine Albumin Precursor // UniProt Knoledge Base  (nem elérhető link)