Kémiai színreakciók - a gombák különböző makro- és mikroszkopikus szerkezeteinek színének megváltozása bizonyos kémiai reagensek hatására . A kémiai kutatási módszert gombaminták azonosításában alkalmazzák a taxonómiai csoportok megkülönböztetésére. A taxonómiai karakter lehet pozitív vagy negatív teszteredmény, vagy a színváltozás változása pozitív reakciókkal, mivel ugyanaz a reagens különböző gombafajokban különböző színeket adhat.
A termőtest egészére jellemző pépes reakciók kimutatására egyszerű vizsgálatokkal , hifák , spórák , bazídiumok és a trama vagy micélium egyéb elemeinek színreakcióinak kimutatására pedig mikroszkópos vizsgálatokat lehet végezni . Vizsgálatokat végezhetünk frissen gyűjtött gomba-, illetve herbáriumi példányokon.
A termőtestek makroszkópos jelei, néha a mikroszkópos vizsgálat során talált jelek nem biztos, hogy elegendőek az egyértelmű meghatározáshoz. Ilyen esetekben a színkémiai reakciókat további kritériumként használják a taxonok esetében .
A legtöbb esetben használt analitikai reagensek nem specifikusak bizonyos gombákban található anyagokra vagy anyagkomplexekre, de gyakran kiderül, hogy specifikusak bizonyos gomba taxonokra, ami lehetővé teszi a módszer széles körű alkalmazását. Az alkalmazott reakciók egy része specifikus, például a benzidinnel és α-naftollal végzett pozitív reakció a lakkáz enzim jelenlétét jelzi a gomba pépében, fenol-tirozinázzal, és az amiloid teszt nem csak a jelenlétének meghatározását teszi lehetővé. specifikus poliszacharidok ( glükánok ) sejtekben, hanem bizonyos következtetéseket levonnak makromolekuláik szerkezetére vonatkozóan.
A kémiai módszert először William Nylander (1822-1899) finn botanikus alkalmazta 1866 -ban a zuzmók taxonómiájára . Nylander észrevette, hogy a különböző fajok eltérően reagálnak a lúgok, hipokloritok , jód , vassók és más reagensek oldatának kitettségére.
Müller később a vegyszerek poliporózus gombákra gyakorolt hatását tanulmányozta, és a Hapalopilus nidulansban a lila elszíneződés megjelenését találta ; Harley felfedezte a fekete tejgomba pép lila színének eltűnését lúg hatására. A 20. század során a kémiai reagensek gombákra gyakorolt hatását számos jól ismert mikológus tanulmányozta ( W. Meltzer , 1924; J. Schaeffer és F. Möller, 1938; R. Kühner és A. Romagnesi , 1953; R. Singer , 1951, 1962, 1969, 1975; A. Meixner, 1975; S. P. Wasser , 1980, 1992). A baziális gombák kémiai színreakcióiról a legteljesebb adatokat Küner és Romagnesi, Singer (1975), Meixner, Wasser munkái tartalmazzák. A zuzmók esetében a kémiai módszert az 1930-as években Ya. Asahina japán mikológus [1] mélyrehatóan tanulmányozta, A. N. Oksner pedig részletesen leírta . [2]
Magával a kémiai módszerrel kapcsolatban két ellentétes vélemény van a mikológusok között:
S. P. Wasser [3] két idézetet ad mindkét létező megközelítésre:
Időről időre megkísérlik kémiai kísérletekkel meghatározni a gombák és zuzmók fajtáit, ami gyakran tiltakozási vihart vált ki. Egy nehezen besorolható, kevés szereplőből álló csoportban, vagy éppen ellenkezőleg, nagyon változatos a további információk csak örömmel fogadhatók.
– A. Burges [4]
A kémiai módszert, mint az egyik legkényelmesebb, leggyorsabb és legmegbízhatóbb, mivel többletinformációt ad a fajok és más taxonok megítélésében, széles körben kell alkalmazni, de mindenképpen más taxonómiai módszerekkel, különösen a morfológiai módszerekkel együtt.
- A. N. Oksner, Kulcs a Szovjetunió zuzmóihoz. Morfológia, taxonómia és földrajzi eloszlás [5]
A vizsgálat eredményeit gyakran összefoglaló formában írják le kémiai képletek (szervetlen reagensekre) vagy rövidítések segítségével, amelyek szerzőnként eltérőek lehetnek, ezért a konvenciók listáit a publikációk tartalmazzák. A reakció adott taxonómiai csoportra való alkalmazhatóságától függően csak pozitív vagy negatív eredményt lehet közölni (például a "KOH+"/"KOH-" bejegyzés pozitív/negatív reakciót jelent lúggal), vagy színváltozás is előfordulhat. fel kell tüntetni (például "KOH+ sárgára vált"). A termőtest egy részét vagy egy bizonyos mikrostruktúrát akkor is jelezzük, ha a reagens hatása a gomba különböző szerkezeteire nem azonos [6] [7] .
Az amiloid a szerkezetek azon képessége, hogy jódoldatok hatására elszíneződjenek . Általában a Meltzer-reagenst használják : 2,5% jódot és 7,5% kálium-jodidot tartalmazó vizes oldathoz azonos térfogatú klorálhidrátot adnak . A reakciót makroszkópikusként és készítmények mikroszkópos festésére használják, ami lehetővé teszi a különböző szerkezetek amiloiditásának meghatározását: spórák, hifák , bazídiumok . Az amiloiditás olyan mintákban is megnyilvánul, amelyeket hosszú ideig (több mint 100 évig) herbáriumban tároltak (Singer, 1975 szerint) [8] . Az amiloiditás jelenléte és mértéke lehetővé teszi a glükánmolekulák - a keményítőhöz hasonló poliszacharidok - szerkezeti jellemzőinek , valamint a gomba mikroszkopikus struktúráinak felületén lévő glükánréteg vastagságának meghatározását. A jód erősen fejlett felületi réteg esetén adszorbeálódik a glükánláncok közötti csatornákban. Ha a láncok erősen elágazóak, a reakció sárgásbarna színt ad, kevésbé elágazó láncok jelenlétében maga az amiloid reakció jelenik meg - intenzív kék, hasonlóan az analitikai kémiában ismert keményítő-jód reakcióhoz. Általában megkülönböztetnek nem amiloid struktúrákat (nem festenek), dextrinoidot vagy pszeudo -amiloidot ( sárga és barna tónusú folt) és amiloidot (kék, kék, majdnem fekete színű folt) [12] .
2005-ben V. A. Spirin és szerzőtársai [13] azt javasolták, hogy a színskála szerint határozzák meg a reakció gradációjának mértékét (zárójelben - a J. Petersen skála szerinti színjelölés [Petersen, 1996]):
Schaeffer keresztreakció : a vágásra üvegrúddal anilinoldat csíkot, majd ezt keresztezve egy 65%-os salétromsav csíkot viszünk fel. Pozitív reakció esetén egy króm-sárga folt jelenik meg a kereszteződésben, majd a szín narancsvörösre változik. A Schaeffer-reakció az Agaricus nemzetség egyik fontos intragenerikus tulajdonsága . Alkalmas a herbáriumban hosszú ideig tárolt anyagokhoz. Yu. Sheffer fedezte fel 1933-ban [8]
A szerves festékekkel történő festést a mikroszkópos készítmények optikai tulajdonságainak javítására és a festett szerkezetek jellemzésére egyaránt használják. Például, ha toluidin festékekkel ( krezilkék ) festik, megkülönböztetik a cianofíliát - kékes elszíneződést és metachromasia - vöröses-rózsaszín vagy vöröses-ibolya festést.