Kinetoplaszt

A kinetoplaszt egy cirkuláris DNS- molekulák hálózata  [ (a DNS -hez ), amelyek óriási mitokondriumokban helyezkednek el, és a mitokondriális genom számos másolatát tartalmazzák [1] [2] . Leggyakrabban a kinetoplaszt korong alakú, bár kivételek ismertek e szabály alól. A kinetoplaszt csak a kinetoplasztid osztályba tartozó protozoákban van jelen . A kinetoplasztok szerkezetének változásai a kinetoplasztidokon belüli filogenetikai kapcsolatokat tükrözhetik [3] . A kinetoplaszt általában a flagellum bazális testének közelében található , és ezért valószínűleg erősen kapcsolódik a citoszkeletonhoz . A kinetoplaszt könnyen láthatóvá válik a sejtekben DAPI festéssel . [4].

Szerkezet

A kinetoplaszt két formában tartalmaz DNS-t: minikörök és maxicircles. A maxigyűrűk 20-40 ezer bázispárt (kilobázis, kb) tartalmaznak, és több tíz között vannak jelen a kinetoplasztban. Egy kinetoplaszt több ezer minigyűrűt tartalmaz, amelyek 0,5-1 kb méretűek. A maxi-gyűrűk a kinetoplasztnak otthont adó óriási mitokondrium működéséhez szükséges fehérjéket kódolnak. A minikörök egyetlen ismert funkciója, hogy irányító RNS -ek képzésén keresztül szabályozzák a maxicircle- ek expresszióját . A maxi- és mini-gyűrűk katenátban vannak egymással, lapos láncos postaszerű hálózatot alkotva . A cDNS-replikáció során először a gyűrűk szétválnak, majd a leánykinetoplasztokban ismét katenálódnak [4] [5] . A cDNS szerkezetét a legjobban a Crithidia fasciculata tanulmányozhatja , amely mini- és maxi-körök katenázott korongja, amelyek többsége nem szupertekercses [3] . Kívülről két fehérjekomplex közvetlenül szomszédos a cDNS -sel, egymáshoz képest 180°-kal elforgatva, és részt vesz a minikörök replikációjában [1] [2] [4] [5] .

A kinetoplasztidok különböző képviselőiben a kinetoplaszt és DNS-e eltérő szerkezettel rendelkezik. A következő lehetőségek ismertek, amelyek eltérnek a fent leírt tipikus sémától [3] :

Replikáció

A kinetoplaszt megkettőződése a szomszédos flagellum megduplázódásával egyidejűleg következik be, közvetlenül a nukleáris DNS-replikáció megkezdése előtt. Egy tipikus kinetoplasztban (mint a Crithidia fasciculata esetében) a replikációt a cDNS minikörök megnyitása indítja el a topoizomeráz II -vel . A szabad minikörök kiterjednek a kinetoplaszt és a belső mitokondriális membrán közötti térbe , amelyet kinetoflagellar zónának neveznek [2] [3] [5] . Ezután a minikörök egy ismeretlen mechanizmuson keresztül ellentétes antipodiális fehérje komplexekbe költöznek, amelyek endonukleázt , helikázt , DNS-polimerázt , DNS-primázt és DNS-ligázt tartalmaznak , amelyek kiküszöbölik a replikációs hibákat az újonnan megduplázódott minikörökben [4] . A frissen megismételt miniköröket szűk rés jelenléte alapján lehet megkülönböztetni a kiforrott miniköröktől. A megkettőzésnek nem kitett minigyűrűk kovalensen zárva maradnak. Közvetlenül a replikáció után minden újonnan duplikált minikör csatlakozik a cDNS-hálózathoz, és a hasadékaik részben kijavódnak [1] [5] .

Miközben a minikör replikációja folytatódik, a cDNS-hálózat folyamatosan forog a lemez központi tengelye körül, hogy megakadályozza, hogy új minikörök kapcsolódjanak az anyai kinetoplaszthoz. Úgy gondolják, hogy a rotáció közvetlenül összefügg a szomszédos flagellum megkettőződésével, mivel a leány alaptest a kinetoplaszt forgásával időben forog a szülőtest körül. A rotáció során a leány kinetoplaszt minikörei feltekercselődnek, és fokozatosan eltolódnak a korong közepe felé, miközben más minikörök lehasadnak az anyai cDNS-ből, és replikáció céljából a kinetoflagellar zónába kerülnek [2] [4] [5] .

A maxi-gyűrűk megkettőzési mechanizmusát nem vizsgálták olyan részletesen, mint a minigyűrűké. Sikerült azonosítani a nabelschnur nevű struktúrát (a német „ köldökzsinórból ”), amely összekapcsolja a leány-cDNS-t az eredetivel, mielőtt szétválnának. FISH segítségével sikerült igazolni, hogy a nabelschnur cDNS maxicircle-ekből áll [4] .

A kinetoplaszt replikáció folyamatában öt szakaszt különböztetnek meg, amelyek mindegyike a szomszédos flagellum megduplázódásához kapcsolódik. 1. I. szakasz . A kinetoplaszt nem kezdett el szaporodni, nincsenek benne antipodiális fehérjekomplexek. 2. szakasz II . Antipodiális komplexek kezdenek megjelenni a kinetoplasztban. Megkezdődik a flagellum bazális testének megkettőződése. 3. III. szakasz . Megkezdődik egy új flagellum szétválása, a kinetoplaszt kétrészes megjelenést kap. 4. IV. szakasz . Lánya kinetoplasztok gyakorlatilag elkülönülnek, és csak nabelschnur kapcsolódnak. 5. V. szakasz . A leánykinetoplasztok végül szétválnak, a nabelschnur elpusztul. A kinetoplasztok szerkezete megegyezik az első szakaszéval [4] .

Javítás

A Trypanosoma cruzi mind a sejtmag DNS-ben, mind a cDNS-ben képes helyreállítani azokat a nukleotidokat , amelyeket a gazdaszervezetben a fertőzés során keletkezett reaktív oxigénfajták károsítottak [6] . A T. cruzi sejtek DNS-polimeráza báziskivágással javítja az oxidatív DNS-károsodást. Valószínűleg ez az enzim kiküszöböli a cDNS replikációja során a genotoxikus stressz által okozott oxidatív károsodását [6] .

Jegyzetek

  1. 1 2 3 Shapiro TA , Englund PT A kinetoplaszt DNS szerkezete és replikációja.  (angol)  // Annual Review Of Microbiology. - 1995. - 1. évf. 49 . - 117-143 . o . - doi : 10.1146/annurev.mi.49.100195.001001 . — PMID 8561456 .
  2. 1 2 3 4 Shlomai J. A kinetoplaszt DNS szerkezete és replikációja.  (angol)  // Current Molecular Medicine. - 2004. - Szeptember ( 4. köt. , 6. sz.). - P. 623-647 . — PMID 15357213 .
  3. 1 2 3 4 5 6 7 Lukes J. , Guilbride DL , Votýpka J. , Zíková A. , Benne R. , Englund PT Kinetoplast DNS network: evolution of an proprobable structure.  (angol)  // Eukarióta sejt. - 2002. - augusztus ( 1. köt . 4. sz .). - P. 495-502 . — PMID 12455998 .
  4. 1 2 3 4 5 6 7 Gluenz E. , Povelones ML , Englund PT , Gull K. The Kinetoplast Duplication Cycle in Trypanosoma brucei Is Orchestrated by Cytoskeleton-Mediated Cell Morphogenesis  //  Molecular and Cellular Biology. - 2010. - december 20. ( 31. évf. , 5. sz.). - P. 1012-1021 . — ISSN 0270-7306 . - doi : 10.1128/MCB.01176-10 .
  5. 1 2 3 4 5 Torri, A. et al. DNS replikáció eukarióta sejtekben . Cold Spring Harbor Laboratory Press. 1996. oldal=1029-42. ISBN 0-87969-459-9
  6. 1 2 Schamber-Reis BL , Nardelli S. , Régis-Silva CG , Campos PC , Cerqueira PG , Lima SA , Franco GR , Macedo AM , Pena SD , ​​​​Cazaux C. , Hoffmann JS , Motta MC , Schenkman S. , Teixeira SM , Machado CR DNS polimeráz béta a Trypanosoma cruziból részt vesz a kinetoplaszt DNS replikációjában és az oxidatív elváltozások helyreállításában.  (angol)  // Molekuláris és biokémiai parazitológia. - 2012. - június ( 183. évf. , 2. sz.). - 122-131 . o . - doi : 10.1016/j.molbiopara.2012.02.007 . — PMID 22369885 .