A hematológiai analizátor egy olyan eszköz (berendezéskészlet), amelyet a vérsejtek kvantitatív vizsgálatára terveztek klinikai diagnosztikai laboratóriumokban. Lehet automatikus vagy félautomata.
A félautomata hematológiai analizátor abban különbözik az automatikustól, hogy a vérminta hígításának folyamatát egy külön készülék - egy hígító - végzi. A teljes vér hígításának elkészítése után a kezelőnek át kell vinnie a hígított mintát a mérőmodulba.
Jelenleg félautomata analizátorokat gyakorlatilag nem gyártanak.
Az Automatic Hematology Analyzer egy teljesen automatizált műszer, amelyben a teljes analitikai folyamat automatikusan lezajlik.
A modern automata analizátorok több tucat mintát (60-tól 120-ig) képesek óránként, a specifikációnak megfelelő pontossággal és reprodukálhatósággal feldolgozni, valamint a beépített memóriában tárolni a vizsgálati eredményeket, és szükség esetén kinyomtatni a beépítettre. hőnyomtató vagy külső nyomtató.
A modern hematológiai analizátorokat a vérsejtek meghatározott mutatóinak nómenklatúrája szerint osztályozzák.
A nyolcparaméteres hematológiai analizátorok a következő paramétereket határozzák meg: vörösvértestek (RBC), leukociták (WBC), vérlemezkék (Plt), hemoglobin (Hb) koncentrációja, valamint a vörösvértestek alábbi paraméterei: az eritrociták átlagos térfogata (MCV), az eritrociták átlagos hemoglobintartalma (MCH ), az eritrociták átlagos hemoglobinkoncentrációja (MCHC), hematokrit (Hct).
Nyolcparaméteres hematológiai analizátorokat jelenleg gyakorlatilag nem gyártanak.
Hematológiai analizátorok osztály 3-diff . A 3-dif osztályú hematológiai analizátorok, az előállított modelltől függően, lehetővé teszik a vérsejtek 16-22 mutatójának meghatározását.
Az ebbe az osztályba tartozó analizátorok a nyolcparaméteres analizátorokat meghatározó paramétereken kívül a leukociták három alpopulációját határozzák meg: a limfociták (Lm), a granulociták (Gr) és az úgynevezett átlagos leukociták (Mid) koncentrációját, valamint százalékuk Lm%, Gr% és Mid%. Innen származik a 3-diff osztály neve. Ezen túlmenően az ebbe az osztályba tartozó hematológiai analizátorok meghatározzák a vörösvértest-térfogat variációs együtthatóját (RDW) és számos, a vérlemezkékre jellemző indikátort: az átlagos thrombocyta térfogatot (MPV), a vérlemezke térfogat arányát (Tct) (a hematokrithoz hasonlóan), a trombocita térfogat variációs együtthatója (PDW).
Az ebbe az osztályba tartozó hematológiai analizátorokkal megszerezhető fontos diagnosztikai információk az eritrociták, leukociták és vérlemezkék térfogat szerinti eloszlási függvényei - hisztogramok.
Hematológiai analizátorok osztály 5-dif. A fő különbség az 5-dif hematológiai analizátorok és a 3-dif analizátorok között az, hogy képesek kimutatni a leukociták mind az 5 alpopulációját: limfociták (Lym), monociták (Mon), neutrofilek (Neu), bazofilek (Bas) és eozinofilek (Eos), valamint százalékos Lym%, Mon%, Neu%, Bas% és Eos% tartalmuk. A 3-dif analizátorokban használt impedanciaszámláló módszer, más néven Coulter-számláló nem képes különbséget tenni a neutrofilek, a bazofilek és az eozinofilek között, ezért az 5-dif analizátorokban más sejtdifferenciálódási módszert alkalmaznak. A leukocita sejtek lézersugárzás diffrakciójának elvén és a szórt sugárzás további elemzésén alapul. Az "átlagos" leukociták mérete nem különbözik eléggé ahhoz, hogy az impedancia módszerrel megkülönböztesse őket, de eltérő belső szerkezettel rendelkeznek, és eltérően lépnek kölcsönhatásba a festékekkel. És a diffrakciós mintázat kimutatásának módszere érzékeny a sejtek belső szerkezetére. Így az eritrocitákat és a vérlemezkéket Coulter-számláló, a leukocitákat pedig külön lézeregység számlálja.
Minden modern hematológiai analizátor mechanikai, hidraulikus, pneumatikus és mérőrendszerek komplexuma. A hidraulikus és pneumatikus rendszerek felelősek a reagensek tartályokból történő vételéért, a minta és a reagensek gázelemző készüléken belüli szállításáért, valamint a hulladék eltávolításáért az analizátorból. A mechanikus rendszer feladata a modelltől függően a mintavevő vagy az automatikus mintavevő mozgatása, valamint a tolószelep és a különféle keverők vezérlése [1] .
A hemoglobin meghatározásának módszere minden típusú analizátor esetében általános. Ez az optikai sűrűség elemzéséből áll a lizált vér kívánt hullámhosszán. A hemoglobin mérésére szolgáló analizátor működési sorrendje a következő:
A lizált minta optikai sűrűsége arányos a vizsgált vér hemoglobintartalmával.
Minden hematológiai analizátort általában saját reagensrendszerhez terveztek, de sok hasonlóság van köztük.
A hematológiai analizátorok reagenskészleteinek fő összetevői: izotóniás hígító ( diuent ), lizálóoldat (hemolitikus), öblítőoldat és tisztítóoldat.
Az analizátor egyedi kialakításától függően a megadott reagenseknek csak egy része szerepelhet az alapkészletben.
Az izotóniás hígító egy rögzített pH -jú , vezetőképességű és ozmolaritású pufferoldat . Az izotóniás szó csak a reagens egyik és nem legfontosabb tulajdonságát jelöli - a szükséges ozmotikus nyomás fenntartását a vérsejtek térfogatának állandóságának biztosítása érdekében. A helyzet az, hogy az eritrociták azt a térfogatot veszik fel, amelyet az oldat ozmolaritása diktál számukra. Az ozmolaritás növekedésével 3:5 másodpercen belül az eritrociták egy bizonyos egyensúlyi térfogatra préselődnek. Ha az oldat ozmolaritása csökken, a vörösvértestek térfogata ennek megfelelően nő. Így az átlagos sejttérfogat (MCV) az izotóniás hígítószer ozmolaritásától függ. Az izotóniás hígítószerben lévő stabilizáló adalékoknak kellő ideig biztosítaniuk kell a vérsejtek biztonságát az első vérhígításnál. Az oldatban lévő antikoagulánsnak hatékonyan meg kell akadályoznia a fibrinrögképződést és a vérlemezke-aggregációt. A leukocitákat három populációba differenciáló hematológiai analizátorok esetében az izotóniás hígító speciális, leukocita membránokat módosító adalékokat tartalmaz. Ebben az esetben az izotóniás hígítót a megfelelő lizálószerrel együtt kell használni. Nem szabad megfeledkezni arról, hogy minden hematológiai analizátor esetében, amelynél a leukociták három populációra differenciálódnak, a standard mód a teljes vérrel való munka. Az előhígítással végzett munkaváltozatnál a vérminta első hígításban való állásának ideje a gyártó utasításai szerint nem haladhatja meg a 30...60 percet, ami az orosz laboratóriumok gyakorlatában nehezen kivitelezhető, ami elsősorban az előhígítási módot használja. A hazai laboratóriumok gyakorlatának követelményei alapján egy egyedi izotóniás hígítót fejlesztettek ki, melyben a leukociták differenciálódása az első hígításban 3 órán át álló vérmintákig fennmarad.
Egy másik lényeges reagens a lizáló oldat ( hemolitikus ), amely vérhígításhoz adva a vörösvértestek lízisét eredményezi, és egyben megőrzi a fehérvérsejteket . Szükséges, hogy az eritrociták hemolízise jó minőségű legyen, mivel a leukocitákat a hemolizátumban számolják, amelyek kezdetben körülbelül 1000-szer kevesebbek, mint az eritrociták. E tulajdonságok biztosítása érdekében a lizáló oldat jellemzően ionos felületaktív anyagok összetett összetételét tartalmazza.
A leukociták három populációba történő differenciálódásával rendelkező analizátorokban a lizáló oldat hatására a leukociták mérete megváltozik, így a limfociták frakciói (a leukocita hisztogram első csúcsa, 35 ... 90 cc), a granulociták (a lizálóoldat jobb szélső csúcsa) leukocita hisztogram, 120 ... ). A hisztogram középső részében (90 ... 120 köb mikron), az úgynevezett "középső" sejtek területén monociták , bazofilek és eozinofilek találhatók . Így a hematológiai analizátor a sejtek méretének elemzésével meg tudja határozni a limfociták, granulociták és "átlagos" sejtek (összesen monociták, bazofilek és eozinofilek) százalékos és abszolút koncentrációját. A minta-előkészítési tényezők mellett a reagensrendszer tulajdonságai is jelentősen befolyásolják a leukocita differenciálódás minőségét.
A mosóoldatok közvetlenül nem vesznek részt a mérési folyamatban, de tulajdonságaik jelentősen befolyásolják az analizátorok analitikai jellemzőinek stabilitását. A Coulter-elvet használó hematológiai analizátorok jellemző tulajdonsága a kis átmérőjű számlálónyílások jelenléte. És, mint tudják, a vér számos olyan anyagot tartalmaz, amelyek hajlamosak lerakódni a hidraulikus rendszer nyílásán és belső felületén. Ez fokozatosan eltömődésekhez és hibás eredményekhez vezet. Egyes esetekben a készülék egyszerűen leáll, és nagyobb tisztítást igényel. Vagyis a mosóoldatok minősége befolyásolja a műszer hosszú távú stabilitását.
A mosóoldatok főként három fajtájúak. Az első típus az analizátor vezetékeinek enyhe mosására szolgáló oldatok a minták között, és nem rendelkeznek különleges tisztító tulajdonságokkal. Az ilyen oldatok felületaktív anyagokat (mosószereket) tartalmaznak. Sajnos a mosószeres mosások kevéssé eltávolítják a fehérjéket. Ezért a fehérjelerakódások eltávolítására nátrium-hipoklorit alapú oldatokat használnak - a mosóoldatok második típusát. Ezek az oldatok nagyon erős fehérjementesítők. A nátrium-hipoklorit oldat azonban nagyon maró anyag, a műanyagból (repednek), fémből (korrodálnak) készült részek nem bírják a vele való hosszú érintkezést. Ezért az ilyen megoldásokkal nem lehet visszaélni. Ezeket a megoldásokat elsősorban vészhelyzetekben alkalmazzák, amikor a számlálónyílás gyors tisztítására van szükség, valamint szervizmunkákhoz.
A készülék minőségi mosása problémájának modern megoldása az enzimatikus mosóoldatok alkalmazása. Az enzimek jelenléte miatt az ilyen oldatok hatékonyan távolítják el a hidraulikus rendszer falán adszorbeált fehérjéket és egyéb anyagokat. Ugyanakkor teljesen semlegesek és nincsenek káros hatással a készülék részeire. Az ilyen mosóoldatok létrehozásának nehézsége az enzimek jól ismert tulajdonságában rejlik, hogy gyorsan elveszítik aktivitásukat. Emiatt viszonylag kevés enzimes mosóoldat gyártója létezik a világon.