Klenov töredéke

Az oldal jelenlegi verzióját még nem ellenőrizték tapasztalt közreműködők, és jelentősen eltérhet a 2015. december 26-án áttekintett verziótól ; az ellenőrzések 2 szerkesztést igényelnek .

A Klenow - fragmens egy  nagy fehérjefragmens, amely az Escherichia coli -ból származó DNS-polimeráz I- nek a szubtilizin proteáz általi enzimatikus hasításából származik. A Klenow-fragmenst először 1970-ben írták le, és 5' → 3' polimeráz aktivitása volt 3' → 5' exonukleáz aktivitással kombinálva (korrektor), de nem rendelkezett 5' → 3' exonukleáz aktivitással [1] .

Más, enzimatikus emésztésből származó kisebb fragmensek rendelkezhettek 5' → 3'-exonukleáz aktivitással, de hiányoztak belőlük a Klenow-fragmensre jellemző két aktivitás.

A Klenow-fragmenst DNS-polimerázként használták a polimeráz láncreakció első módszereiben [2] , és csak egy idő után váltották fel hőstabil Taq polimerázzal [3] .

Jelenleg DNS jelölésre ("kitöltés" 3' rövid végekre "véletlenszerű hexamerekkel"), DNS szekvenálásra Sanger módszerrel és második szál DNS szintézisére használják .

Jegyzetek

  1. ↑ Klenow H és Henningsen I. A dezoxiribonukleinsav polimeráz exonukleáz aktivitásának szelektív eliminációja Escherichia coli B-ből korlátozott proteolízissel   // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States  : folyóirat. - 1970. - 1. évf. 65 . - 168-175 . o . - doi : 10.1073/pnas.65.1.168 . — PMID 4905667 .
  2. ↑ Saiki R.K. et al. A β-globin genomiális szekvenciáinak enzimatikus amplifikációja és a restrikciós hely elemzése a sarlósejtes vérszegénység diagnosztizálásához  (angol)  // Science : folyóirat. - 1985. - 1. évf. 230 . - P. 1350-1354 . - doi : 10.1126/tudomány.2999980 . — PMID 2999980 .
  3. ↑ Saiki et al. DNS primer által irányított enzimes amplifikációja hőstabil DNS polimerázzal  (angol)  // Science : Journal. - 1988. - 1. évf. 239 . - P. 487-491 . - doi : 10.1126/tudomány.2448875 . — PMID 2448875 .