Hematoxilinnel és eozinnal festve

A hematoxilin és eozin festés (hematoxilin-eozin festés) az egyik leggyakoribb festési módszer a szövettanban . Széles körben használják az orvosi diagnosztikában , különösen az onkológiában az eltávolított vagy biopsziás szövetek megfestésére .

A festés magában foglalja a hematoxilin alapfestéket , amely a bazofil sejtszerkezeteket élénk kékre festi, és az alkoholos savfestést, az eozin Y -t, amely az eozinofil sejtszerkezeteket vörös-rózsaszínre festi. A bazofil struktúrák általában nukleinsavakat ( DNS -t és RNS -t ) tartalmaznak: a sejtmagot , riboszómákat és a citoplazma RNS-ben gazdag régióit . Az eozinofil struktúrák intra- és extracelluláris fehérjéket , például Lewy-testeket tartalmaznak . A citoplazma eozinofil közeg. Az eritrociták mindig élénkvörösre festődnek.

Hematoxilin-eozin festési technika

  1. A metszetekről ortoxilénben vagy toluolban eltávolítjuk a paraffint , csökkenő koncentrációjú alkoholokkal és vízbe tesszük (két adag xilol vagy toluol – 3-5 perc, 96°-os etanol – 3 perc, 80°-os etanol – 3 perc, 70 perc). ° etanol - 3 perc, desztillált víz - 5 perc).
  2. Hematoxilinnel festve 7-10 percig (a festék érettségétől függően).
  3. Öblítse le desztillált vízben 5 percig.
  4. Differenciáljunk 1%-os sósavval 70°-os etanolban, amíg a részek megbarnulnak.
  5. Öblítse le desztillált vízzel, majd gyenge (0,5%-os) ammóniaoldattal , amíg a részek kék színűvé nem válnak.
  6. Eozin vizes oldatával festve 0,5-1 percig (a kívánt színtől függően).
  7. Három adag desztillált vízzel mossuk, hogy eltávolítsuk a felesleges eozint.
  8. Távolítsa el a vizet a szakaszokból egy adag 70°-os etanollal, két adag 96°-os etanollal. Expozíció az alkohol minden egyes részében - 2 perc.
  9. A metszeteket két adag karbol-xilolban tisztítják ( 1:4 vagy 1:5 arányú olvadt fenol és xilol vagy toluol keveréke) - 1 perc.
  10. A metszeteket két részletben xilolban vagy toluolban dehidratáljuk. Hagyja szeleteket 2 percig.
  11. Zárja be a metszeteket kanadai balzsamba vagy szintetikus táptalajba a szövettani metszetek bezárásához.

Egyes szerkezetek nem festődnek jól hematoxilinnel és eozinnal (általában hidrofób ), és más festési módszereket igényelnek. Például a sejtek lipidekben és mielinben gazdag területei festetlenek maradnak: zsírsejtek , a neuronok axonjainak mielinhüvelye , a Golgi-készülék membránja stb.

Lásd még

Linkek