Vicia teszt

Az oldal jelenlegi verzióját még nem ellenőrizték tapasztalt közreműködők, és jelentősen eltérhet a 2012. május 14-én áttekintett verziótól ; az ellenőrzések 3 szerkesztést igényelnek .

Vicia teszt (Vicia teszt) - növényi béta rendszer[ kifejezés ismeretlen ] , amelyet különböző tényezők genotoxikológiai vizsgálataiban használnak. A Nemzetközi Gene-Tox Program és az Egészségügyi Világszervezet által javasolt 9 fő növényi genetikai teszt egyike. Ebben a tesztben a Vicia faba L. ( kerti bab ) gyökérmerisztémájának sejtjeit vizsgáljuk . Jelenleg ez az egyik legszélesebb körben használt genetikai teszt a világon [1] [2] [3] .

A módszer jellemzői

Alkalmazás

A 20. század közepe óta a Vicia faba gyökér merisztémasejtek kényelmes citogenetikai modellként váltak népszerűvé a genetikusok és morfológusok körében. Ez a Vicia faba genom számos jellemzőjének köszönhető :

  1. kis méretű kromoszómák
  2. kis számú kromoszóma
  3. magas fokú kromatinkondenzáció, amely lehetővé teszi a mitózis összes fázisának világos megfigyelését

A Vicia-tesztet leggyakrabban a természetes és antropogén eredetű víz és talaj mutagén aktivitásának monitorozására használják. A tesztet élelmiszer-adalékanyagok, növényvédő szerek, nanorészecskék, sugárzás és sok más tényező genetikai biztonságának vizsgálatában is használják [1] .

Specificitás

A különböző tényezők mutagén hatásának vizsgálatakor a Vicia-tesztben két standard és univerzális genetikai elemzést alkalmaznak: a kromoszóma-rendellenességek antitelofázis-analízisét és a mikronukleusz-tesztet (amely a leggyakoribb). Emellett Vicia faba merisztémákon is vizsgálható a mitotikus aktivitás dinamikája [2] [1] .

A kísérlet beállítása

A kísérletekhez ugyanabból a terményből származó babmintákat használnak. A magvakat 5 napig szobahőmérsékleten csíráztatjuk Petri-csészékben, szűrőpapírral vagy desztillált vízzel megnedvesített vattával. Amikor a gyökerek elérik az 5 mm-t, távolítsa el a hegyét, hogy ösztönözze a másodlagos gyökerek növekedését. A kísérlet végén csak a három legnagyobb palántát választjuk ki, és mindegyiknél megmérjük a három leghosszabb másodlagos gyökér hosszát. A gyökereket ezután levágjuk, és Clark-féle fixálószerrel rögzítjük (1 rész jégecet: 3 rész 96%-os (100%) etanol). A merisztémákat 1%-os acetoorceinnel megfestjük (festés előtt 1 M HCl-lel 600 °C-on 6 percig maceráljuk) Préselt preparátumokat készítünk. A mikronukleusok gyakoriságának megállapításához minden preparátumon 1000 interfázist vizsgálunk. Csoportonként összesen 6 készítmény készül. A készítmény mitotikus aktivitásának értékeléséhez 1000 osztódó sejtet elemeznek a mitózis minden fázisában [1] .

Statisztika

A nem-paraméteres Mann-Whitney tesztet, majd a Kruskal-Wallis tesztet alkalmazzuk.

Lásd még

Jegyzetek

  1. ↑ 1 2 3 4 Anne-Sophie Foltête, Adrien Dhyèvre, Jean-François Ferard, Sylvie Cotelle. Vicia-micronucleus teszt javítása talajminőség felmérésére: Javaslat nemzetközi szabványosításra: cikk. - Kemoszféra, 2011. - S. 1624-1629 .
  2. ↑ 1 2 Ma TH Vicia citogenetikai tesztek környezeti mutagénekre. Az Egyesült Államok Környezetvédelmi Ügynökségének Gene-Tox programjának jelentése. - Mutációkutatás, 1982. - S. 257-271 .
  3. ↑ KI. Útmutató a mutagén és rákkeltő vegyi anyagok kimutatására szolgáló rövid távú vizsgálatokhoz: cikk. - Genf: WHO, 1989. - S. 189 .
 Modellszervezetek a biológiai kutatásban