N-etil-maleimid

Az oldal jelenlegi verzióját még nem ellenőrizték tapasztalt közreműködők, és jelentősen eltérhet a 2019. október 13-án felülvizsgált verziótól ; az ellenőrzéshez 1 szerkesztés szükséges .
N-etil-maleimid
Tábornok
Szisztematikus
név		 1-Etil-pirrol-2,5-dion
Rövidítések NEM
Hagyományos nevek Etilmaleimid
Chem. képlet C 6 H 7 NO 2
Fizikai tulajdonságok
Moláris tömeg 125,12528 g/ mol
Termikus tulajdonságok
Hőfok
 •  olvadás Olvadáspont: 43-46 °C
 •  forralás 210 °C
Osztályozás
Reg. CAS szám 128-53-0
PubChem 4362
Reg. EINECS szám 204-892-4
MOSOLYOK   O=C1\C=C/C(=O)N1CC
InChI   1/C6H7NO2/c1-2-7-5(8)3-4-6(7)9/h3-4H,2H2,1H3HDFGOPSGAURCEO-UHFFFAOYSA-N
CHEBI 44485
ChemSpider 4209
Az adatok standard körülményeken (25 °C, 100 kPa) alapulnak, hacsak nincs másképp jelezve.
 Médiafájlok a Wikimedia Commons oldalon

Az N -etil- maleimid (NEM) a maleinsav származéka . Tartalmaz egy imid funkciós csoportot , és egy aktivált alkén , amely tiolokkal reagál,és gyakran használják fehérjékben és peptidekben lévő cisztein -maradékok módosítására [1] .

Kémiai tulajdonságok

Az N -etil -maleimid egy Michael-akceptor . Ez azt jelenti, hogy nukleofileket, például tiolokat adhat hozzá. Az ilyen reakció eredményeként képződő tioéter nagyon erős C-S kötéssel rendelkezik, és a reakció gyakorlatilag irreverzibilis. A reakció 6,5-7,5 pH -értéken megy végbe. Az N -etil -maleimid reakcióba léphet aminokkal, vagy lúgosabb pH-n hidrolízisen megy keresztül. Az N -etil -maleimidet széles körben alkalmazzák a tiolcsoportok enzimológiában betöltött funkcionális szerepének meghatározására . Az összes cisztein peptidáz irreverzibilis inhibitora, mivel az aktív centrumban a tiolcsoportok alkilezését végzi (lásd az ábrát) [2] [3] .

Esettanulmányok

A NEM blokkolja a hólyagos transzportot . 20-25 mM N -etil -maleimidet tartalmazó lízispuffereket használunk a fehérje dezumoiláció gátlására a Western-blot során . A NEM-et deubiquitiniláció- gátlóként is használják .

Arthur Kornberg és munkatársai N -etil-maleimidet használtak a DNS-polimeráz III kikapcsolására, és aktivitásának összehasonlítására a DNS-polimeráz I-vel. Kornberg Nobel-díjat kapott a DNS-polimeráz I felfedezéséért, amelyet akkoriban a bakteriális replikáció fő polimerázának tartottak . bár később fia, Thomas kimutatta, hogy a baktériumokban a fő replikációs polimeráz a DNS-polimeráz III, amelyet akkor még nem fedeztek fel.

Az N -etilmaleimid aktiválja a juhok és kecskék vörösvérsejtjeiben az ouabain-érzéketlen klór - függő kálium -ionbevitelt [4] . Tizenhat évvel később ez a felfedezés hozzájárult a K + /Cl - ko -transzporterek felfedezéséhez emberi embrionális sejtekben, amelyek a KCC1 cDNS izoformáit vezették be [5] . Azóta az N -etil -maleimidet széles körben használják diagnosztikai eszközként a K + /Cl - szimportok jelenlétének meghatározására különböző állatfajok sejtjeiben [6] [7] [8] [9] .

Jegyzetek

  1. ↑ Tiol reaktív szondák Archiválva az eredetiből 2008. január 28-án. az Invitrogennél
  2. ↑ Nelson, D.L.; Cox, M. M. "Lehninger, Principles of Biochemistry", 3. kiadás. Megéri publikálni: New York, 2000.
  3. ↑ Gregory, JD (1955) J. Am. Chem.
  4. ↑ N etilmaleimid által indukált klorid függő K+ fluxus genetikailag alacsony K+ értékű birka és kecske vörösvértestekben.
  5. ↑ Gillen CM, Brill S, Payne JA, Forbush B 3.: A K-Cl kotranszporter molekuláris klónozása és funkcionális expressziója nyúlból, patkányból és emberből.
  6. ↑ A K-Cl kotranszport szabályozása: a funkciótól a génekig.
  7. ↑ K+ Cl kotranszport: Szulfhidril, kétértékű kationok és a volumenaktiválás mechanizmusa vörösvértestben.
  8. ↑ . doi : 10.1016/j.cell.2009.05.031 .
  9. ↑ Jennings, ML & Al-Rohil, NSJ gen. fiziol. 95, 1021–1040, 1990

Külső linkek