A trombingenerációs teszt a véralvadási rendszer állapotának szerves indikátora .
A trombin a véralvadási rendszer fő enzime. Ez katalizálja ennek a rendszernek a fő reakcióját, a fibrinogén fibrinné történő átalakulását . Ezenkívül a trombin az, amely a rendszer fő szabályozását végzi, aktiválja az V, VIII, VII, XI, XIII alvadási faktorokat , protein C-t, vérlemezkéket , a fibrinolízis trombin által aktivált gátlóját. Végül (ami gyakorlati szempontból fontos) több trombin képződik a koaguláció során (10-100-szor), mint az összes többi koagulációs szerin proteáz együttvéve. A trombin kinetikájának tanulmányozása sok olyan további információval szolgálhat, amely nem érhető el a véralvadás kinetikájának egyszerű megfigyeléséből. A fibrinrög csak a véralvadási folyamat végeredménye; fontos megfigyelni, de a folyamat mechanizmusainak megértéséhez mélyebbre kell tekinteni.
A trombinkoncentráció monitorozásának módszerei meglehetősen régen jelentek meg: már az 1960-as években is nagyon aktívan vizsgálták a trombin képződésének kinetikáját. A trombinkoncentráció meghatározásának klasszikus módszere a véralvadás volt: egy ismeretlen trombinkoncentrációjú mintát nem rekalcifikált plazmával kevertek össze (mint a trombinidő tesztben), és az alvadási időből határozták meg a trombin koncentrációt. A trombinkoncentráció idő függvényében görbe ábrázolásához rövid időközönként mintákat vettünk. Egyetlen görbe mérése két magasan képzett laboráns egy órás összehangolt munkáját igényelte, a módszer széles körű klinikai alkalmazása elképzelhetetlen volt.
A kromogén, majd a fluorogén szubsztrátok megjelenése az 1980-as években forradalmasította a véralvadás vizsgálatát [1] , [2] . Az ilyen szintetikus szubsztrát olyan molekula, amelyet a szerin-proteináz felismer és levág . Ez a bemetszés a szignálmolekula, a címke lehasadásához vezet a szubsztrátról. A címke vagy megváltoztatja az oldat optikai sűrűségét (kromogén, azaz színező szubsztrát), vagy megvilágítva képes fluoreszkálni (fluorogén szubsztrát). A trombin szubsztrátokat közvetlenül a plazmához lehetett adni, és rögzíteni lehetett a véralvadási jelet. A jelnövekedés sebessége ekkor arányos a trombinkoncentrációval, így a trombin időfüggését a kísérleti görbéből egyszerű differenciálással és a standard görbére történő normalizálással kapjuk meg. A korai kromogén szubsztrátok nem voltak túl kényelmesek a trombinképződés mérésére, mivel plazma defibrinációt igényeltek; egyébként a vérrög megjelenése megzavarta a színező molekula megjelenésének megfigyelését. De a fluorogén szubsztrátok, amelyek vágáskor erősen világító címkét adtak, lehetővé tették a trombin képződésének közvetlen mérését a közönséges plazmában. Óriási volt a termelékenységnövekedés: ahelyett, hogy két ember egy egész órán keresztül ugyanazt a görbét mérte volna, egy ember betöltötte a lemezt mintákkal, betette a lemezes fluoriméterbe, és egy óra alatt több tucat mintáról kaphat adatokat.
Az 1990-es évek óta aktívan alkalmazzák a trombinképzés új módszerét a klinikán. A holland Konrad Hemker által kifejlesztett és kifejlesztett megközelítést Európában évről évre egyre inkább alkalmazzák, az utóbbi években pedig szinte a világ minden táján, így Oroszországban is elérhetővé vált. Ennek a módszernek az alkotója által készített orosz nyelvű áttekintése a [3] -ban található . Egy jellegzetes trombinképződési görbe látható az [1]-ben .
Általában két fő paramétert különböztetnek meg benne: a késleltetési időt (alvadási késleltetési idő) és az endogén trombin potenciált (a trombinképződési görbe alatti területet). Számos kísérlet és teszt kimutatta, hogy ez a két paraméter hatékonyan jelzi a kóros folyamatokat.
Akárcsak a thromboelasztográfiában , a trombingenerációs teszt eredményei nagymértékben függnek a kísérleti körülményektől: az aktiválás módjától, az aktivátor koncentrációjától, a vérlemezkékben szegény vagy dús plazma használatától, a segédanyagok adagolásától. Ezen paraméterek megváltoztatásával számos alvadási zavar kimutatható. Gyenge plazmában kis mennyiségű szöveti faktorral végzett standard aktiválást alkalmaznak a plazma koagulációs rendellenességeinek kimutatására [4] . Kényelmes a minták tömeges elemzéséhez, különösen, ha szállításra vagy fagyasztásra van szükség. A dús plazmában a trombinképződés ezen túlmenően kimutathatja a vérlemezke-alvadási zavarokat, sikeresen kimutatva a vérzésre való hajlamot Glanzmann thrombasthenia, Bernard-Soulier szindróma, thrombocyta-aggregáció gátló gyógyszerek szedése esetén [5] . Ha thrombomodulint adnak a plazmához , akkor ez a teszt még néhány hiperkoagulációs rendellenességet is kimutat: az V. alvadási faktor Leiden mutációját, az orális fogamzásgátlók szedésének következményeit és másokat [6] .