Az optikai vagy fénymikroszkóp ( más görög szóból μικρός „kicsi” és σκοπέω „vizsgálok”) egy optikai eszköz , amellyel szabad szemmel láthatatlan tárgyakról (vagy szerkezetük részleteiről) nagyított képeket készíthetünk .
Lehetetlen pontosan meghatározni, hogy ki találta fel a mikroszkópot. Feltételezik, hogy Hans Jansen holland szemüvegkészítő és fia, Zachary Jansen találta fel az első mikroszkópot 1590 -ben, de ez maga Zachary Jansen állítása volt a 17. század közepén . A dátum természetesen nem pontos, mivel kiderült, hogy Zachary 1590 körül született. A két lencse kombinálásának lehetőségét, hogy nagyobb növekedést érjenek el, először 1538-ban javasolta a híres veronai orvos, Girolamo Fracastoro . A mikroszkóp feltalálói cím másik versenyzője Galileo Galilei volt . 1609-ben fejlesztette ki az "occhiolino" ("occhiolino") összetett mikroszkópot domború és homorú lencsékkel . Galileo mikroszkópját a Federico Cesi által 1603 -ban alapított Accademia dei Lincei -n mutatta be a nagyközönségnek. Francesco Stellati képe a háromról. a méhek VII. Urbanus pápa pecsétjének részét képezték, és az első publikált mikroszkopikus szimbólumnak tartják (lásd "Stephen Jay Gould, The Lying stones of Marrakech, 2000"). Tíz évvel Galileo után Cornelius Drebbel feltalál egy új típusú mikroszkópot, két domború lencsével. Christian Huygens , egy másik holland, az 1600 -as évek végén feltalált egy egyszerű kétlencsés okulárrendszert , amely akromatikusan állítható volt, és ezért óriási előrelépést jelent az optika történetében (Huygens tervezte a távcső szemlencsét). A Huygens okulárokat a mai napig gyártják, de hiányzik belőlük a látómező szélessége, és a szemlencsék mikroszkóp alatti elhelyezése a mai széles látómezős okulárokhoz képest kényelmetlen a szem számára. 1665-ben az angol Robert Hooke megtervezte saját mikroszkópját, és parafán tesztelte. E kutatás eredményeként jelent meg a "sejtek" elnevezés. Anthony van Leeuwenhoek ( 1632-1723 ) az első, akinek sikerült felhívnia a biológusok figyelmét a mikroszkópra, annak ellenére, hogy az 1500 -as évektől már gyártottak egyszerű nagyítólencséket , és a vízzel töltött üvegedények nagyító tulajdonságait. az ókori rómaiak ( Seneca ) említették. Van Leeuwenhoek kézműves mikroszkópjai viszonylag kis darabok voltak, egyetlen, nagyon erős lencsével. Használatuk kényelmetlen volt, de csak azért tették lehetővé a képek részletes vizsgálatát, mert nem vették át az összetett mikroszkóp hiányosságait (egy ilyen mikroszkóp több lencséje megkétszerezte a képhibákat). Körülbelül 150 évnyi optika fejlesztésre volt szükség ahhoz, hogy az összetett mikroszkóp ugyanolyan képminőséget tudjon nyújtani, mint az egyszerű Leeuwenhoek mikroszkópok. Tehát bár Anthony van Leeuwenhoek nagy mestere volt a mikroszkópnak, a közhiedelemmel ellentétben nem ő volt a feltalálója.
Stefan Hell (Stefan Hell) német tudós csapata, a Max Planck ( Göttingen ) tudományos közösség Biofizikai Kémiai Intézetéből , Mariano Bossi (Mariano Bossi) argentin tudóssal együttműködve 2006-ban kifejlesztett egy optikai mikroszkópot, az úgynevezett. Nanoszkóp , amely lehetővé teszi az Abbe akadály leküzdését és a körülbelül 10 nm -es (és 2010-ben még kisebb) objektumok megfigyelését, miközben a látható fény tartományában marad, miközben kiváló minőségű háromdimenziós képeket készíthet olyan tárgyakról, amelyek korábban nem voltak elérhetők a hagyományos eszközök számára. fény- és konfokális mikroszkópia [1] [2] .
Folyamatban van a hatszögletű rácsos (hBN) bór-nitrid kristályok előállítására irányuló munka 99%-os tisztaságú bórizotópokból. A kristály felületén kialakuló polaritonok miatt egy ilyen lencseanyag lehetővé teszi a diffrakciós határ ismételt csökkentését és tízes, sőt nanométeres egységnyi felbontás elérését [3] .
A Tomszki Állami Műszaki Egyetem orosz tudósai úgy fejlesztették tovább a nanoszkópot, hogy nem mikrolencséket használnak, mint a klasszikus konfigurációban, hanem speciális, aranylemezes diffrakciós rácsokat. Ha egy ilyen eszközről képet kapunk, az anomális amplitúdó apodizáció, a Fabry-Perot rezonancia és a Fano rezonancia egyidejűleg aktiválódik. Együtt hozzájárulnak a felbontás növeléséhez a hagyományos diffrakciós ráccsal összehasonlítva, akár 0,3 λ-ig. [négy]
Az emberi szem egy biológiai optikai rendszer, amelyet egy bizonyos felbontás jellemez, vagyis a megfigyelt objektum elemei (pontként vagy vonalként felfogott) legkisebb távolsága, amelynél még megkülönböztethetők egymástól. Normál szemnek a tárgytól való távolodáskor az ún. legjobb látótávolság (D = 250 mm), az átlagos normál felbontás 0,176 mm. A mikroorganizmusok mérete, a legtöbb növényi és állati sejt, kisméretű kristályok , fémek és ötvözetek mikroszerkezetének részletei stb. sokkal kisebbek ennél az értéknél. A különféle típusú mikroszkópokat az ilyen objektumok megfigyelésére és tanulmányozására tervezték. Mikroszkópok segítségével meghatározták a mikroobjektumok alakját, méretét, szerkezetét és sok egyéb jellemzőjét. Az optikai mikroszkóp látható fényben lehetővé tette a 0,20 μm -ig terjedő elemek közötti struktúrák megkülönböztetését . Így volt ez az optikai mikroszkóp nanoszkóp megalkotása előtt is [5] .
A videotechnika fejlődése jelentős hatással volt az optikai mikroszkópokra. Az elektronika a megfigyelések dokumentálásának egyszerűsítésén túl lehetővé teszi a rutinműveletek automatizálását. És ha megtagadja a közvetlen szemmel való megfigyelést, nincs szükség klasszikus okulárra. A legegyszerűbb esetben a mikroszkóp korszerűsítésekor az okulár helyett egy speciális optikai kialakítást telepítenek a kép mátrix fotodetektorra való kivetítésére. A fotodetektor képe a számítógépre és/vagy a kijelzőre kerül. Vannak kombinált professzionális mikroszkópok is, amelyek harmadik optikai porttal vannak felszerelve a fényképészeti berendezések felszereléséhez. Egyes modern eszközökben előfordulhat, hogy a közvetlen szemmel történő megfigyelés lehetősége teljesen hiányzik, ami lehetővé teszi egyszerű és könnyen használható, kompakt kialakítású eszközök létrehozását. A többelemes fotodetektorok használata nemcsak a látható, hanem a spektrum vele szomszédos tartományaiban is lehetővé teszi a megfigyelések elvégzését.
A mikroszkóp optikai rendszere a fő elemekből áll - egy objektívből és egy okulárból. Fém alapon elhelyezett mozgatható csőben vannak rögzítve, amelyen tárgyasztal található. Az objektív és a szemlencse közötti kiegészítő lencsék nélküli optikai mikroszkóp nagyítása megegyezik a nagyításaik szorzatával [6] .
A modern mikroszkóp szinte mindig rendelkezik megvilágító rendszerrel (különösen írisz diafragmával ellátott kondenzátorral), makro- és mikrocsavarokkal az élesség beállításához, valamint kondenzátor helyzetszabályozó rendszerrel.
A céltól függően további eszközök és rendszerek használhatók speciális mikroszkópokban.
A mikroszkóp objektív egy összetett optikai rendszer, amely egy tárgyról felnagyított képet alkot, és a mikroszkóp fő és legfontosabb része. A lencse olyan képet hoz létre, amely az okuláron keresztül látható. Mivel a szemlencsék jelentős nagyítást tudnak biztosítani, a lencse által okozott optikai torzítást a szemlencse is felnagyítja. Ez sokkal nagyobb követelményeket támaszt a lencse minőségével szemben, mint a szemlencsével szemben.
A biológiai mikroszkópok és más mikroszkópok (kivéve a sztereoszkópikus mikroszkópok) céljai nagyrészt egységesek és felcserélhetők. A cserélhetőséget elsősorban az objektív mechanikai (csatlakozási) paraméterei befolyásolják.
A lencse mechanikai paramétereiAz objektívek összekötő szálát 1858-ban szabványosította a Royal Microscopical Society ( RMS , ISO 8038, GOST 3469). Ma ezt a fonalat szinte minden mikroszkópban használják, kivéve a sztereomikroszkópokat vagy a speciálisakat. Menetátmérő 4/5" (~20 mm), menetemelkedés 1/36".
A lencsék cserélhetőségét a szálon kívül a parfokális távolság is befolyásolja – a készítmény és a mikroszkóp lencsetartója közötti távolság. A legtöbb modern mikroszkóp 45 mm-es parfokális távolságú objektívekhez készült. Korábban a 33 mm-es objektíveket széles körben használták. A mikroszkóp nem mindig teszi lehetővé a rendellenes parfokális távolságú lencsék felszerelését, mivel a tárgyasztalnak nincs elegendő mozgása az előkészülettel, hogy kompenzálja a különbséget. Az optikai tervezés egyre bonyolultabbá válása miatt nagy méretű objektívek jelennek meg nagy parfokális távolsággal (például 60 mm és 95 mm) [7] . A lencse és a vizsgált tárgy közötti szabad távolságot a lencse munkatávolságának nevezzük . Általában ez a távolság minél kisebb, minél nagyobb a lencse nagyítása. Az objektív munkatávolsága plusz az objektív hossza megegyezik az objektív parfokális távolságával.
A lencse optikai paramétereiA mikroszkóp objektívet névleges nagyítás jellemzi (általában 2,5; 3,2; 4; 5; 10; 20; 40; 63; 100; 120 tartományból). Kívül:
Ezenkívül fel van tüntetve a torzításkorrekció betűjelölése:
Az objektív alkalmazási jellemzőinek betűjelei:
Az okulár a mikroszkópnak a szem felé néző része, amely a mikroszkóp objektíve által adott optikai kép bizonyos nagyításával való megtekintésére szolgál . A mikroszkópok szemlencséinek tipikus nagyítása 5-25 egység. Akárcsak a lencsék, a szemlencsék is különböznek a minőségben, vagyis a szemlencse által okozott optikai torzítás mértékében. A lencse torzítási hozzájárulása azonban általában dominál egy kiegyensúlyozott mikroszkópban, mivel a lencse torzítását tovább növeli a szemlencse, míg magának a szemlencsének a torzítását nem. Ezért az okulárokat általában más paraméterek jellemzik, elsősorban a kezelő kényelme. Általában ez a kényelem a látómező szélességét és a szem megkönnyebbülését jelenti.
A pupilla eltávolítása - a szemlencse és a szem távolsága. Általában 5...20 mm tartományba esik. Ha a kezelő szemüveget visel, akkor gyakorlatilag lehetetlen 5 mm-es eltolású szemlencse használata. A legkényelmesebb távolság 10...20 mm: több szemüveggel kevesebb szemüveg nélkül. A túl nagy szem könnyítés szintén kényelmetlen.
Az okulár látómezeje a szemlencsén keresztül látható kép szögmérete. Úgy gondolják, hogy a széles látómező (a kép nagy szögmérete) kényelmesebb a munkához, mint a keskeny. A széles látómezős szemlencséket gyakran W betűvel jelölik, és vizuálisan megkülönböztetik őket a nagy lencsefelülettel.
Az első mikroszkópokban a kutatók kénytelenek voltak természetes fényforrásokat használni. A megvilágítás javítására tükröt, majd homorú tükröt kezdtek használni, amellyel a napsugarakat vagy a lámpákat a készítményre irányították. A modern mikroszkópokban a megvilágítást kondenzátor szabályozza.
KondenzátorKondenzátor (a latin condense szóból – sűrűsödik, sűrít), rövidfókuszú lencse vagy lencserendszer, amelyet optikai eszközben használnak a megtekintett vagy vetített tárgy megvilágítására. A kondenzátor a fényforrásból származó sugarakat összegyűjti és a tárgyra irányítja, beleértve azokat is, amelyek hiányában a tárgy mellett elhaladnak; a fényáram ilyen "sűrűsödése" következtében a tárgy megvilágítása élesen megnő. A kondenzátorokat mikroszkópokban, spektrális műszerekben, különféle típusú vetítőkben (például diaszkópokban, epidioszkópokban, fényképészeti nagyítókban stb.) használják. Minél összetettebb a kondenzátor kialakítása, annál nagyobb a nyílása . 0,1-ig terjedő numerikus rekesz esetén egyszerű lencséket használnak; 0,2–0,3 rekesznyílásnál kétlencsés kondenzátor, 0,7 felett háromlencsés kondenzátor. A legelterjedtebb kondenzátor két egyforma sík-domború lencséből áll, amelyek egymással szemben gömb alakúak, hogy csökkentsék a szférikus aberrációt . Néha a kondenzátorlencsék felülete bonyolultabb alakú - paraboloidális, ellipszoid stb. A mikroszkóp felbontása a kondenzátor rekesznyílásának növekedésével növekszik, ezért a mikroszkóp kondenzátorai általában összetett két- vagy háromlencsés rendszerek. A tükör- és tükörlencsés kondenzátorokat széles körben alkalmazzák mikroszkópokban és filmvetítő eszközökben is, amelyek rekesznyílása igen nagy is lehet - az összegyűjtött sugárnyaláb 2u nyitási szöge eléri a 240°-ot. Gyakran több lencse jelenlétét a kondenzátorokban nemcsak a rekesznyílás növelésének vágya okozza, hanem az is, hogy a tárgy egyenletes megvilágítására van szükség a fényforrás nem egyenletes szerkezetével [5] .
Sötét mező kondenzátorA sötétmezős kondenzátorokat sötétmezős optikai mikroszkópiában használják . A fénysugarakat a kondenzátor úgy irányítja, hogy azok ne közvetlenül a lencsebemenetbe jutnak be. A képet a minta optikai inhomogenitása miatt szórt fény alkotja. Egyes esetekben a módszer lehetővé teszi az átlátszó objektumok szerkezetének tanulmányozását színezés nélkül. Számos sötétmezős kondenzátort fejlesztettek ki lencsés vagy tükörlencsés optikai sémával.
Sok tárgyat optikai tulajdonságaik miatt nehéz megkülönböztetni a környezet hátterétől. Ezért a mikroszkópok különféle eszközökkel vannak felszerelve, amelyek megkönnyítik az objektum kiválasztását a környezet hátterében. Leggyakrabban ezek különböző módszerek egy objektum megvilágítására:
Egy objektum interferencia kontrasztjának módszere . Mivel a fény elektromágneses hullám, megvan a fázis fogalma. A megfigyelt tárgyon a fény fázistorzulásai láthatók. Ehhez egy speciális kondenzátor és objektív kombinációját használják.
A tárgyasztal olyan felületként működik, amelyre egy mikroszkopikus készítményt helyeznek. A különböző kialakítású mikroszkópoknál a tárgyasztal képes a minta koordinátamozgását az objektív látóterében, függőlegesen és vízszintesen, vagy a minta adott szögben történő elforgatását biztosítani.
Diák és fedőlapokAz első mikroszkópos megfigyeléseket közvetlenül valamilyen tárgy felett végezték (madártoll, hópelyhek, kristályok stb.). Az áteresztő fényben való megfigyelés megkönnyítése érdekében a készítményt üveglapra (üveglemezre) kezdték elhelyezni. Később a preparátumot vékony fedőlemezzel rögzítették, ami lehetővé tette mintagyűjtemények, például szövettani gyűjtemények készítését. A függő csepp módszerrel végzett kutatáshoz lyukkal ellátott üveglemezeket használnak - Ranvier kamrák .
Számláló kamrákA folyadékban szuszpendált sejtek mennyiségi elszámolására számlálókamrákat használnak - speciális kialakítású üveglemezeket. Az orvostudományban Gorjaev-kamerát használnak a vérsejtek számbavételére .
LencsevédőkA fókuszkeresés során előfordulhat olyan helyzet, amikor az objektív optika egy asztalhoz vagy mintához támaszkodik. A mikroszkópokban léteznek olyan mechanizmusok, amelyek megakadályozzák az érintkezést vagy csökkentik a következmények súlyosságát. Az első állítható korlátozókat tartalmaz az asztal függőleges mozgásához. A második rugós lencséket tartalmaz, amelyekben a lencseszerelvényt testár veszi körül, és mozgatható. Amikor a lencse érintkezésbe kerül a gyógyszerrel, a test dagálya megakadályozza a lencsére való ütközést, és a mobilitás csökkenti az ütközési erőt.
MérőberendezésekA mikroszkóp optikai útjában egy példaszerű minta (sraffozás vagy egyéb ismert vetített méretű jelek) jelenléte lehetővé teszi a megfigyelt objektumok méretének jobb becslését.
A lencse által alkotott kép közvetlenül a szemlencsébe táplálható, vagy több azonos képre osztható. Az osztás nélküli mikroszkópokat monokulárisnak nevezik, az egyik szemen keresztül néznek. A két szemmel való megfigyelés kényelme előre meghatározta a két egyforma okulárral rendelkező binokuláris mikroszkópok széles körű alkalmazását. Ezen kívül a mikroszkóp felszerelhető fényképészeti berendezéssel, amely akár a szokásos okulárok helyett, akár külön optikai portba szerelhető. Az ilyen mikroszkópokat trinokulárisnak nevezik.
Egyes mikroszkópok lehetővé teszik a tárgy megvilágítását a mikroszkóp lencséjén keresztül. Ebben az esetben egy speciális lencsét használnak, amely a fénykondenzátor funkcióit is ellátja. A mikroszkóp optikai útjába egy áttetsző tükör és egy fényforrás csatlakozó van beépítve. Leggyakrabban egy ilyen megvilágítási mechanizmust használnak fluoreszcens mikroszkópiában ultraibolya sugárzásban.
A sztereomikroszkópokat mikroszkóp alatti finom munkákra tervezték, például óragyártásban, mikroelektronikában, mikromodellezésben, idegsebészetben stb. Az ilyen munkákhoz a megfigyelt tárgyak mikroszkóp alatti helyzetét három koordinátában kell helyesen felmérni, amihez sztereó kell. látás, nagy mélységélesség (látómélység) és jelentős hely a lencse alatt a munkához. A sztereomikroszkópok nagyítása alacsony (néhány egység vagy tíz), a lencse nagy munkatávolsággal rendelkezik (az optikától a megfigyelési pontig terjedő távolság általában néhány centiméter), nincs állítható asztaluk és beépített világítási rendszerük. A kényelem kedvéért a sztereó mikroszkóp nem „fordítja meg” a képet. A sztereomikroszkóp lencséje legtöbbször nem cserélhető.
A metallográfiai kutatások sajátossága abban rejlik, hogy meg kell figyelni az átlátszatlan testek felületének szerkezetét. Ezért a mikroszkóp a visszavert fény séma szerint épül fel, ahol egy speciális megvilágító van az objektív oldalára szerelve. A prizmák és tükrök rendszere a fényt egy tárgyra irányítja, majd a fény egy átlátszatlan tárgyról visszaverődik és visszakerül a lencsébe [5] .
A modern, egyenes kohászati mikroszkópokat a tárgyasztal felülete és az objektívek közötti nagy távolság, valamint a nagy függőleges tárgytávolság jellemzi, amely lehetővé teszi a nagy mintákkal történő munkavégzést. A maximális távolság elérheti a több tíz centimétert [9] . De általában fordított mikroszkópokat használnak az anyagtudományban , mivel nincsenek korlátozások a minta méretére vonatkozóan (csak a súlyra), és nem igénylik a minta referencia- és munkafelületének párhuzamosságát (ebben az esetben egybeesnek).
Amikor a fény visszaverődik a tárgyakról, a polarizációja megváltozhat. Az ilyen tárgyak vizuális azonosítása érdekében speciális polarizáló szűrővel nyert polarizált fénnyel világítják meg őket . A fény visszaverve egy polarizáló mikroszkóp optikai útján halad át, amelybe egy második polarizáló szűrő is be van építve. Így csak az a fény fog áthaladni ezen a szűrőpáron, amely ennek megfelelően megváltoztatja a polarizációját, amikor visszaverődik a megfigyelt készítményről. A gyógyszer többi része elsötétül.
Egyes anyagok lumineszcens tulajdonságokkal rendelkeznek , azaz képesek egy hullámhosszú fényt kibocsátani, ha egy másikkal besugározzák. A lumineszcens vagy fluoreszcens mikroszkópok olyan mikroszkópok, amelyek hullámhossz-vezérelt megvilágítóval vannak felszerelve az ilyen készítmények fényének megfigyelésére. Mivel a ragyogás a megvilágítási oldalról jön létre, a megfigyelő oldaláról történő megvilágítás a leghatékonyabb, vagyis közvetlenül a mikroszkóp lencséjén keresztül, amit az ilyen mikroszkópokban sikeresen megvalósítanak. Ezenkívül az ultraibolya tartományban történő működésre tervezett mikroszkópok speciális lencsékkel vannak felszerelve, amelyek áteresztik az ultraibolya sugárzást, és nem rendelkeznek saját parazita lumineszcenciával az ultraibolya sugárzásban. Az ilyen lencsék FLUOR vagy hasonló jelzéssel vannak ellátva. A fluoreszcens mikroszkópok gyakran konfokálisak , emellett szubdiffrakciós felbontási technológiákat is alkalmaztak hozzájuk. Az ilyen mikroszkópokat széles körben használják biológiai kutatásokhoz.
A mérőmikroszkópokat a megfigyelt objektumok szög- és lineáris méreteinek pontos mérésére használják. A mikroszkóp optikai útjában lévő méretek becsléséhez van egy példaszerű minta (sraffozás vagy egyéb jelek), ismert vetített mérettel. Laboratóriumi gyakorlatban, gépészetben és gépészetben használják.
![]() |
|
---|---|
Bibliográfiai katalógusokban |