Romanovsky-Giemsa festés
Az oldal jelenlegi verzióját még nem ellenőrizték tapasztalt közreműködők, és jelentősen eltérhet a 2019. július 15-én felülvizsgált
verziótól ; az ellenőrzések 2 szerkesztést igényelnek .
A Romanovsky - Giemsa festés egy citológiai módszer mikroorganizmusok , sejtszerkezetek és különféle típusú szövetek (beleértve a vért is ) festésére fénymikroszkópos vizsgálat céljából . Javasolta 1904-ben [1] Gustav Giemsa . A szerző változatában a festék neve "Giemsasche Lösung für die Romanowsky Färbung" (Giemsa-oldat a festéshez Romanovsky szerint) [2] . Az acidofil képződményeket a vörös különböző árnyalataival, a bazofil képződményeket a lilától a kékig színezi.
A festék előkészítése
A kenetek festése előtt a kész folyékony festéket 1-2 csepp festék/1 ml desztillált víz arányban hígítjuk. A keneteket 20-25 percig festjük 37°C-on, nedves kamrában (zárt Petri-csésze nedves szűrővel az alján). A festés után a keneteket folyó vízben mossuk, levegőn szárítjuk és olajmerítéssel megvizsgáljuk.
A Romanovsky-Giemsa színező keveréket, amely a Romanovsky-Wright festéken alapul , por formájában (kereskedelmi festék) egyenlő térfogatú metil-alkohol és glicerin keverékében (800 mg festék 100 ml oldószerben) feloldjuk. ). A festék rosszul oldódik, ezért jobb, ha 300 mg / 100 ml oldószerrel őröljük, majd keverés közben adjuk hozzá a festéket a kívánt koncentráció eléréséig. A festék elkészítése gyakran több napot vesz igénybe. Fontos, hogy vegytiszta metil-alkoholt és glicerint használjunk oldószerként, mivel a szennyeződések rontják a festék tulajdonságait. Metil-alkohol helyett 100%-os etil-alkohol is használható. Az elkészített színezőkeveréket hűvös, száraz helyen, szorosan lezárt edényben tároljuk.
Giemsa speciális standard megoldás
Azur II - 3,772 g
Eozin - 2,165 g
Metilénkék - 1,563 g
Metanol (
ChDA ) - 750,0 ml
Glicerin (
ChDA ) - 256,0 ml
Festési technika
- A metil-alkoholban rögzített keneteket oldattal (1 ml kész folyékony festék + 2 ml bázikus pufferoldat + 47 ml desztillált víz) festjük 40-120 percig (a festés időtartamát tapasztalati úton választjuk meg). Foszfát puffert használnak, de a puffer pH-ja a kenet típusától függ: csontvelő-kenetnél - 5,8-6,0, vérkenetnél - 6,4-6,5, protozoák kimutatására - 6,8, malária plazmódium - 7, 0-7.2.
- Öblítse le desztillált vízben, szárítsa meg és vizsgálja meg merítéssel.
Színezés eredménye
A baktériumok lilásvörösre, a sejt citoplazma kékre, a sejtmagok vörösre festődnek. A protozoonok festésekor a citoplazma kék színűvé válik, a sejtmagok vörös-ibolyákká válnak.
A vérkenet festésének eredménye
- a limfociták citoplazmája kék-kék színű, magjaik - intenzív lilától liláig terjedő színekben;
- a monociták citoplazmája zavaros kékesszürke színű, magjaik világosabb lila-vörös, finom azurofil szemcsésségben festődnek;
- a bazofil granulátumok intenzív kék-lila színűek;
- az eozinofil granulátumok narancs-rózsaszínre festenek;
- a neutrofil granulátumok lilától liláig festettek;
- a leukociták magjai bíborvörös színűek, jól látható kromatin szerkezettel; a magvak jól megkülönböztethetők;
- a vérlemezke granulomerek vörösre, a hialomerek kékre festettek;
- a hemoglobin rózsaszín színe .
Lásd még
Jegyzetek
- ↑ Giemsa G. Eine Vereinfachung und Vervollkommnung meiner Methylenazur-Methylenblau-Eosin-Färbemethode zur Erzielung der Romanowsky-Nochtschen Chromatinfärbung. (német) // Centralbl f Bakt etc: magazin. - 1904. - Bd. 37 . - S. 308-311 .
- ↑ Bezrukov A. V. Színezés Romanovszkij szerint: az elsőbbség kérdéséről / A Romanovszkij-effektus felfedezésének 120. évfordulóján. - 12 s. (nem elérhető link)
Szótárak és enciklopédiák |
|
---|