A decellularizáció az allograftok sejtösszetevőktől különböző módszerekkel (fizikai, enzimatikus és kémiai) történő tisztítására szolgáló eljárás annak érdekében, hogy természetes extracelluláris mátrixon alapuló, nem immunogén, hatékony és biztonságos konstrukciót kapjunk .
Decellularizációs módszereket alkalmaznak a szövetsebészetben, amikor holttestű allograftokat használnak , majd ezt követően decellularizálják, és kvantitatív kontrollálják a graftban lévő maradék DNS-t. Az ilyen eljárás elkerüli a donor antigének bejutását a recipiens szervezetébe, és ennek eredményeként megakadályozza az immunrendszer nemkívánatos reakcióit. A decelluláris mátrixok már tartalmazzák a megfelelő fehérjéket és növekedési faktorokat a kezdeti adhézióhoz, a felszíni proliferációhoz és a sejtdifferenciálódáshoz, ami megkönnyíti a sejtrés kialakítását [1] . A páciens sejtjei által benépesített, természetes decelluláris allogén vagy xenogén mátrix alapján létrehozott, azaz személyre szabott bio-mesterséges vagy szövetmanipulált graftok biokompatibilisek, atrombogének lesznek, mentesek a szintetikus protézisek egyéb hátrányaitól [2] .
A natív szerv sejtes komponensének eltávolítására különféle módszerek alkalmazhatók a szövetek befolyásolására - fizikai, enzimatikus és kémiai. A fizikai módszerek közé tartozik a mechanikai hatás, a fagyasztás-olvadás ciklusok, az ultrahangos kezelés. Az enzimatikus decellularizáció tripszint , endo- és exonukleázokat használ. A kémiai detergenseket is széles körben használják - savakat és lúgokat, enzimeket, hipertóniás és hipotóniás oldatokat, ionos és nemionos detergenseket, kelátképző szereket és bimodális detergenseket [1] . A hatóanyag megválasztását, a decellularizáció módját és az aktív oldatok expozíciós időtartamát a vizsgált szerv anatómiai és szövettani jellemzőinek, szerkezetének és tulajdonságainak figyelembevételével határozzák meg [3] .
A decellularizáló szer sikertelen kiválasztása a mátrix szerkezetének tönkremeneteléhez, mechanikai és biológiai tulajdonságainak elvesztéséhez vezethet, mivel bármilyen vegyi anyag valamilyen mértékben károsítja a mátrixot, és csak a megfelelő módszerrel és időtartammal lehet minimalizálni a mátrixot. ennek a hatásnak a következményei, így nyitva marad az optimális decelluláris technológiájú szövetek megtalálása az intercelluláris anyag minél épebb megőrzésével [1] . Pontosan a mikroarchitektonika és az intercelluláris anyag komponenseinek megőrzése teszi lehetővé a biomérnöki vázak sejtproliferációját , kemotaxisát , a páciens szöveteinek válaszreformációját, ugyanakkor nem tartalmazhatnak donorsejtek degradációs termékeit és vegyi tisztítószerek maradványait.
Mivel a decellularizációs folyamat eltávolítja az extracelluláris mátrix fő összetevőit , például a sejtek szaporodását és véredények kialakulását okozó molekulákat, ami gyengíti a sejtek tapadását az extracelluláris mátrixhoz és veszélyezteti a recelluláris mátrixot, egy további rehabilitációs lépést vezettünk be. decellularizáció és újracellulizáció között. A rehabilitációs szakaszban, például a májban, olyan molekulákban gazdag oldatot injektálnak a decellularizációval nyert extracelluláris mátrixba, mint a SPARC és a TGFB1 , a laboratóriumban, tápközegben növesztett májsejtek által termelt fehérjék . Ezek a fehérjék elengedhetetlenek az egészséges májhoz, mert a májsejtek szaporodását és véredények kialakulását idézik elő. A mátrixnak a tenyésztőközeg alóli fehérjével való bevonásával történő előzetes rehabilitációja jelentősen javította a későbbi recellarizációt. [4] [5]
A devitalizációt meg kell különböztetni a devitalizációtól : a devitalizáció során csak az élő sejtek eliminálódnak, megtartva a sejttartalmat a mátrix szerkezetében [6] .