Parafiletikus baktériumcsoport _ | |||||
---|---|---|---|---|---|
| |||||
Név | |||||
Agrobacterium | |||||
cím állapota | |||||
elavult taxonómiai | |||||
tudományos név | |||||
Agrobacterium Conn 1942 emend. Sawada et al. 1993 |
|||||
Szülő taxon | |||||
A Rhizobium Frank
nemzetség 1889 emend. Young et al. 2001 |
|||||
Fajták | |||||
lásd a szöveget |
|||||
|
Agrobacterium (lat.) - Gram-negatív baktériumok csoportja , amelyet először független nemzetségként G. J. Conn izolált 1942-ben. A nemzetség tagjai horizontális génátvitelre képesek , ami daganatokat okoz a növényekben. Ennek a nemzetségnek a leginkább kutatott és jól tanulmányozott faja az Agrobacterium tumefaciens . Az Agrobacterium széles körben ismert arról a képességéről, hogy viszonozza a DNS- átvitelt önmaga és a növények között. Ennek a tulajdonságnak köszönhetően a nemzetség tagjai a géntechnológia fontos eszközévé váltak.
Az Agrobacterium nemzetség összetételében heterogén. 1998-ban átsorolásra került sor, melynek eredményeként az Agrobacterium összes képviselőjét négy új nemzetségbe osztották: Ahrensia , Pseudorhodobacter , Ruegeria és Stappia [1] [2] . A későbbi, 2001-2003-as vizsgálatok azonban arra a következtetésre jutottak, hogy a fajok többségét a Rhizobium nemzetségbe kell besorolni [3] [4] [5] .
Az A. tumefaciens rosszindulatú daganatok képződését okozza a növényekben - epe. Általában a gyökér és a hajtás találkozásánál fordulnak elő. Az ilyen daganatok egy bakteriális Ti-plazmid ( T-DNS ) növényi sejtekbe történő konjugatív átviteléből származnak. A közeli rokon A. rhizogenes faj gyökérdaganatokat is okoz, és rendelkezik egy speciális Ri plazmiddal ( gyökérindukáló ) . Bár az Agrobacterium taxonómiai helyzetét folyamatosan felülvizsgálják, továbbra is lehetséges három biovariánsra osztani ezt a nemzetséget : A. tumefaciens , A. rhizogenes és A. vitis . Az A. tumefaciens és az A. rhizogenes csoportba tartozó törzsek a Ti vagy Ri plazmidot , míg az A. vitis csoportba tartozó törzsek , amelyek általában csak a szőlőt fertőzik , a Ti plazmidot hordozhatják. A Ri plazmidot hordozó természetes mintákból nem Agrobacterium törzseket izoláltak , és laboratóriumi vizsgálatok kimutatták, hogy a nem Agrobacterium törzsek is hordozhatják a Ti plazmidot. Az Agrobacterium számos természetes törzse nem rendelkezik sem a Ti, sem a Ri plazmiddal, ezért nem virulens.
A plazmid T-DNS-t félig véletlenszerűen juttatják be a gazdasejt genomjába [6] , és a tumorképződésért felelős gének expresszálódnak, ami végső soron epeképződéshez vezet. A T-DNS olyan géneket tartalmaz, amelyek a nem szabványos aminosavak , általában az oktopin vagy a nopalin szintéziséhez szükséges enzimeket kódolják . Itt vannak kódolva az auxin és a citokinin növényi hormonok szintéziséhez szükséges enzimek is , valamint különféle opinek bioszintéziséhez , amelyek a baktériumok számára más mikroorganizmusok számára hozzáférhetetlen szén- és nitrogénforrást biztosítanak. Ez a stratégia szelektív előnyt biztosít az Agrobacterium számára [7] . A növény hormonális egyensúlyának megváltozása a sejtosztódás megsértéséhez és daganat kialakulásához vezet. Az auxin és a citokin aránya határozza meg a daganat morfológiáját (gyökérszerű, alaktalan vagy hajtásszerű).
Bár az Agrobacterium általában csak a növényeket fertőzi meg , immunhiányos emberekben opportunista betegségeket okozhat [8] [9] , de nincs bizonyíték arra, hogy káros lenne az egészséges egyénekre. Az Agrobacterium radiobacter által okozott emberi betegségről a legkorábbi jelentés Dr. J. R. Kane (Skócia) volt (1988) [10] . Az újabb vizsgálatok megerősítették, hogy az Agrobacterium megfertőz és genetikailag átalakítja bizonyos típusú emberi sejteket, és képes bejuttatni a T-DNS-t a sejtgenomba. A vizsgálatot emberi szövettenyészet felhasználásával végezték, így ennek a szervezetnek a természetben való patogenitását illetően nem készült értékelés [11] .
Az Agrobacterium azon képességét , hogy génjeit növényekbe és gombákba tudja átvinni , a biotechnológiában , különösen a géntechnológiában használják a növények teljesítményének javítására. Általában módosított Ti vagy Ri plazmidokat használnak erre a célra. Először is, a plazmidot „semlegesítik” a tumorfejlődést okozó gének eltávolításával; a T-DNS egyetlen része az átviteli folyamathoz szükséges két kicsi (25 bázispár) élismétlődés. A sikeres transzformációhoz legalább egy ilyen ismétlés szükséges. Mark Van Montagu és Joseph Schell a Genti Egyetemről ( Belgium ) felfedezték az Agrobacterium és a növények közötti géntranszfer mechanizmusát , ami az Agrobacterium DNS-ének módosítására alkalmas módszerek kidolgozásához vezetett a gének növényi sejtekhez való hatékony eljuttatása érdekében [12] [13 ]. ] . Dr. Mary-Dell Chilton vezette kutatócsoport első alkalommal bizonyította, hogy a virulencia gének eltávolítása nem befolyásolja hátrányosan az Agrobacterium azon képességét, hogy DNS-ét bejusson a növényi genomba (1983).
A növényi sejtbe bejuttatandó géneket egy speciális növényi transzformációs vektorba klónozzák, amely egy semlegesített plazmid T-DNS-régiójából és egy szelektálható markerből (például egy antibiotikum-rezisztencia-génből) áll, amely lehetővé teszi olyan növények kiválasztását, sikeresen átalakultak. Továbbá a transzformált növényeket antibiotikumot tartalmazó táptalajban neveljük, és azok, amelyek nem hordozzák genomjukban a T-DNS-t és a rezisztenciagént, elpusztulnak.
Az Agrobacterium segítségével történő transzformáció kétféleképpen történhet. A protoplasztokat vagy levéllemezeket Agrobacteriummal inkubálják, majd az egész növényt szövettenyésztési technikákkal regenerálják. Az Arabidopsis transzformálásának standard módszere a virágmártási módszer: a virágokat Agrobacterium tenyészetbe mártják, és a baktériumok olyan csírasejteket alakítanak át, amelyek női ivarsejteket termelnek . Ezután a kapott magvak antibiotikum-rezisztencia-ellenőrzésére alkalmasak (vagy bármely más marker segítségével kiválaszthatók). Alternatív módszer az agroinfiltráció , ahol a baktériumsejt-tenyésztő oldatot sztómán keresztül juttatják a levélbe .
Az Agrobacterium nem fertőz meg minden növényfajt, de számos más hatékony transzformációs technika létezik, például a génfegyver .
Az Agrobacterium szerepel a következő GMO -k létrehozásához használt genetikai anyagok forrásainak listáján az Egyesült Államokban [14] :
A faj helyzete az Agrobacterium nemzetségben [15] | Aktuális pozíció |
---|---|
"A. aggregatum" Ahrens 1968 | Labrenzia aggregata (Uchino et al. 1999) Biebl et al. 2007 [16] |
"A. albilineans" (Ashby 1929) Savulescu 1947 | Xanthomonas albilineans (Ashby 1929) Dowson 1943 emend. van den Mooter és Swings 1990 [17] |
A. atlanticum Rüger és Höfle 1992 | Ruegeria atlantica (Rüger és Höfle 1992) Uchino et al. 1999 -es módosítás. Vandecandelaere et al. 2008 |
A. ferrugineum ( ex Ahrens és Rheinheimer 1967) Rüger és Höfle 1992 | Pseudorhodobacter ferrugineus (Rüger és Höfle 1992) Uchino et al. 2003 |
A. gelatinovorum ( ex Ahrens 1968) Rüger és Höfle 1992 | Thalassobius gelatinovorus (Rüger és Höfle 1992) Arahal et al. 2006 |
"A. kieliense" Ahrens 1968 | Ahrensia kielensis corrig. ( ex Ahrens 1968) Uchino et al. 1999 [18] |
A. larrymoorei Bouzar és Jones 2001 | Rhizobium larrymoorei (Bouzar és Jones 2001) Young 2004 |
A. meteori Ruger és Höfle 1992 | Ruegeria atlantica (Rüger és Höfle 1992) Uchino et al. 1999 -es módosítás. Vandecandelaere et al. 2008 |
A. radiobacter (Beijerinck és van Delden 1902) Conn 1942 | Rhizobium radiobacter (Beijerinck és van Delden 1902) Young et al. 2001 |
"A. rathayi" (Smith 1913) Savulescu 1947 | Rathayibacter rathayi (Smith 1913) Zgurskaya et al. 1993 [19] |
A. rhizogenes (Riker et al. 1930) Conn 1942 emend. Sawada et al. 1993 | Rhizobium rhizogenes (Riker et al. 1930) Young et al. 2001 |
A. rubi (Hildebrand 1940) Starr és Weiss 1943 | Rhizobium rubi (Hildebrand 1940) Young et al. 2001 |
"A. sanguineum" Ahrens és Rheinheimer 1968 | Porphyrobacter sanguineus ( ex Ahrens és Rheinheimer 1968) Hiraishi et al. 2002 [20] |
A. stellalatum ( ex Stapp és Knösel 1954) Rüger és Höfle 1992 | Stappia stellulata (Rüger és Höfle 1992) Uchino et al. 1999 -es módosítás. Beebl et al. 2007 |
A. tumefaciens (Smith és Townsend 1907) Conn 1942 typus | Rhizobium radiobacter (Beijerinck és van Delden 1902) Young et al. 2001 |
A. vitis Ophel és Kerr 1990 | Allorhizobium vitis ( Ophel és Kerr 1990) Mousavi et al. 2016 |
![]() | |
---|---|
Taxonómia |