Kultúra (mikrobiológia)

A vetés ( bakposev ) a mikroorganizmusok táptalajon történő tenyésztésének egyik helyhez kötött módszere, amelyet az orvosi mikrobiológiában kulturális diagnosztikára, valamint a biokémiai és biológiai tulajdonságok tanulmányozására használnak különféle biotechnológiai célokra. A mintában lévő vizsgált baktériumok mennyiségétől függően az oltást sűrű tápközegen végezzük (izolált telepek kinyerése és a tenyészet tisztaságának meghatározása érdekében). Ha a vizsgált anyag mikroorganizmus-tartalma elhanyagolható, akkor az oltást folyékony dúsító táptalajon kell elvégezni. Különféle vetési módok léteznek [1] .

Tápanyaghordozó

Egyszerű

Speciális

A speciális módszereket egy adott komponens hozzáadása vagy az alap megváltoztatása jellemzi.

Választható

A választható módszerekre jellemző, hogy csak a kérdéses mikroorganizmus növekedését érik el.

Differenciáldiagnosztika

Lehetővé teszi az egyes baktériumtípusok, -fajok és -csoportok azonosítását.

Vetéstechnika

Terményekhez [2] mikrobiológiai hurkokat , ritkábban tűket és spatulákat használnak . Leggyakrabban kémcsövet és Petri-csészét használnak a tenyésztéshez . A baktériumhurok univerzális eszköz a tenyésztéshez . Ezen kívül az injekciós vetéshez speciális baktériumtűt , Petri-csészékre pedig fém- vagy üveglapátokat használnak . Folyékony anyagok beoltásához a hurokkal együtt beosztásos és Pasteur pipettákat használnak.

Vetés szilárd táptalajra (in vitro)

Vetéskor a bal kezébe vesznek egy kémcsövet, a jobb oldalival pedig a parafát a negyedik és ötödik ujjal szorosan összefogva kiveszik. A hurkot ugyanannak a kéznek a többi ujjával először vízszintes , majd függőleges helyzetben tartva nyílt lángba tesszük és vörös lángra égetjük . Az oltóanyagot egy lehűtött hurokkal összegyűjtjük, majd a kémcsövet dugóval lezárjuk, a kémcső szélét előzőleg alkohollámpa lángja fölé tartva . A parafát nem szabad elégetni. Ezután a ferde agart tartalmazó kémcsőbe egy oltóanyagot tartalmazó hurkot vezetünk be, leengedve a táptalaj alsó részében lévő kondenzátumhoz, és az anyagot cikk-cakk mozdulatokkal eloszlatjuk az agar ferde felületén. A hurok eltávolítása után égesse el a kémcső szélét, és zárja le parafával. A hurkot egy égő lángjában flambírozzuk, és fogantyúval lefelé állványba helyezzük. A tenyészcsöveket előzetesen aláírják , feltüntetve az oltás dátumát, a vizsgálat számát és a tenyészet nevét.

Vetés sűrű táptalajra (Petri-csészében)

Sűrű tápközegen Petri-csészében termelt "gyep". Ehhez, miután bal kézzel kissé kinyitotta a fedelet, az oltóanyagot hurokkal vagy pipettával felvisszük a tápagar felületére a Drygalsky módszer szerint. Az oltás inkubációja után a baktériumok egyenletes, folyamatos szaporodása jelenik meg, telepekre osztva. Az izolált baktériumtenyészetek azonosítását a baktériumok morfológiájának, az egyes fajokban rejlő tenyésztési, biokémiai és egyéb jellemzőik tanulmányozásával végezzük.

A telep  egyfajta mikroorganizmus képviselőinek látható izolált halmozódása, amely egy kolóniaképző egység ( CFU ) szilárd tápközegen (a felszínen vagy annak mélyén) történő szaporodásával jön létre. A különböző fajokhoz tartozó baktériumkolóniák morfológiájukban, színükben és egyéb kulturális jellemzőikben különböznek egymástól.

A mikroorganizmusok kulturális differenciálódása

A telepek [3] méretben, alakban, színben, állagban, élkontúrban, szerkezetben és felületi jellegben különböznek:

Folyékony tápközegben egyes baktériumtenyészetek diffúz zavarosságot adnak, míg másokat a fenékhez közeli, parietális növekedés jellemzi. Egyes kultúrák filmeket képeznek a táptalaj felületén, mások csapadékot képeznek a cső alján.

Az anaerobok termesztése jelentősen eltér az aerobok termesztésétől : mivel a légkör jelentős mennyiségű oxigént tartalmaz , speciális vetőtechnikák , táptalajok és anaerosztát segítségével távolítják el a környezetből [3] .

Lásd még

Jegyzetek

  1. Prozorkina N.V., Rubashkina L.A. Mikrobiológia, virológia és immunológia alapjai. - Rostov-on-Don: "Phoenix", 2002. - S. 135.
  2. K. D. Pjatkin. Mikrobiológia virológiával és immunológiával. - M: "Gyógyászat", 1971. - S. 84.
  3. 1 2 L.B. Boriszov. Útmutató az orvosi mikrobiológiai, virológiai és immunológiai laboratóriumi vizsgálatokhoz. - Medicina, 1992. - S. 31-44. — ISBN 5-2225-00897-6 .