Bradford módszer

A Bradford-módszer  az egyik kolorimetriás módszer az oldatban lévő fehérjék mennyiségi meghatározására. Marion M. Bradford biokémikus javasolta 1976 - ban .  [1] [2] M. Bradford cikke az Analytical Biochemistry folyóiratban , amely az oldatban lévő fehérje mennyiségi meghatározásának módszerével foglalkozik, az egyik legtöbbet idézett tudományos cikk a világon.

Alapelv

A módszer a Coomassie Brilliant Blue G-250 festék argininnel és hidrofób aminosavmaradékokkal való reakcióján alapul . A kötött forma kék színű, abszorpciós maximuma 595 nm-en. Így az oldat fényabszorpciójának növekedése 595 nm hullámhosszon arányos az oldatban lévő fehérje mennyiségével. [3]

A módszer jó értéket ad a fehérjekoncentrációnak 2 µg/ml és 120 µg/ml tartományban (ezen határokon belül a felszívódás növekedésének lineáris függése a koncentrációtól, általában a módszer érzékenysége függ a meghatározandó fehérje és a festék koncentrációjának aránya: minél több festék, annál érzékenyebb a módszer ), kevésbé "szeszélyes" a Lowry-módszerhez képest .

Egyéb módszerek

Jegyzetek

  1. Bradford, MM ( 1976 ) Gyors és érzékeny módszer a fehérje mikrogramm mennyiségének meghatározására, a fehérje-festék kötés elvét alkalmazva . Anális. Biochem. 72 , 248-254.
  2. Marion Bradford forradalmasította a kutatást . Letöltve: 2021. május 18. Az eredetiből archiválva : 2021. május 18.
  3. Knorre D. G., Myzina S. D. Biological chemistry. - 3. - Moszkva: Felsőiskola, 2000. - 479 p. - 7000 példány.  — ISBN 5060037207 .

Linkek