Gén fegyvert

Az oldal jelenlegi verzióját még nem ellenőrizték tapasztalt közreműködők, és jelentősen eltérhet a 2019. július 7-én felülvizsgált verziótól ; az ellenőrzések 4 szerkesztést igényelnek .

A  génpisztoly ( biolisztikus részecskeszállító rendszer ) egy növényi transzfekcióra tervezett eszköz . A génpisztoly plazmid DNS -sel bevont nehézfém-részecskéket szállít . Ezt a technológiát gyakran bioballisztikának és biolisztikának nevezik (az angol  bioballistics, biolistics szóból ).

A génfegyver segítségével bármilyen típusú sejtet lehet módosítani, beleértve a növényi sejteket is. Ebben az esetben mind a sejtmag , mind az organellumok genetikai módosulása , például plasztidok , genetikai módosulások következhetnek be .

Eszköz

A génpuskát légfegyvernek tervezték, amely volfrámrészecskéket lőtt ki . A részecskéket riportergénekkel és módosított hagymasejtekkel vonták be . A riportergén expressziója a hagymaszövetekben sikeres transzformációt jelez.

Az első génpisztoly a szögpisztolyon alapult . Egy csepp volfrámport genetikai anyaggal felvittek egy golyóra, és egy Petri-csészébe lőtték , amely elé egy kivágással ellátott tányért helyeztek a golyó megállítására. A golyót egy fémlemez állította meg, és a volfrám részecskék genetikai anyaggal a Petri-csészére hullottak. A központban lévő sejteket a fémrészecskék teljesen elpusztították, de a periféria mentén érintetlenek maradtak, és átalakulás ment végbe bennük .

Jelenleg arany- és ezüstrészecskéket használnak, mivel az arany a wolframhoz képest nem mérgező a sejtekre.

Alkalmazás

A génpisztolyokat főként növényi sejtek transzfektálására használják. Alkalmazása állati sejtekhez is lehetséges.

Növények

A génfegyverek célpontja gyakran a Petri-csészén növekvő kallusz (differenciálatlan növényi sejtek). A sejtek egy részét nem károsítják jelentősen a fémrészecskék, a részecskék felszínéről származó DNS behatol a sejtmagba, és beépülhet a növényi kromoszómákba .

A kiválasztott, betéttel ellátott sejteket növényi hormonokkal (például auxinokkal és gibberellinek ) kezelik, szöveteket, sőt egész növényeket is nyernek.

Ember és állatok

A DNS-oltóanyagok bejuttatására génpisztolyokat használnak.

Génpisztolyokat használnak a sejtek jelölésére szövettenyészetekben. A fluoreszcens fehérjéket kódoló plazmid DNS bejuttatása lehetővé teszi a sejtek láthatóvá tételét a tenyészetekben. [egy]

A C. elegans féreg átalakítására génpisztolyokat is használnak a mikroinjekció alternatívájaként .

Jegyzetek

  1. Gan W, Grutzendler J, Wong WT, Wong ROL, Lichtman JW, Az idegrendszer többszínű diolisztikus címkézése lipofil festékkombinációkkal Neuron 27. kötet, 2. szám, 219-225

Irodalom